外周型苯二氮卓受体对脑老化和癫痫敏感性的影响

摘要

目的1.自然衰老过程中部分脑区组织粗提物外周型苯二氮卓受体(PBRs)下降，但PBRs改变是否影响认知功能未见报道。通过观察衰老大鼠学习记忆功能、脑细胞亚组分和血小板膜PBRs的改变以及脱氢表雄酮(DHEA)的干扰作用，探讨PBRs在脑老化中的作用。 2.癫痫的反复发作有其重要的生化基础，PBRs与癫痫发病有关，因此可能影响到癫痫敏感性。通过观察癫痫患者血小板膜PBRs改变、癫痫大鼠发作行为和不同脑区PBRs的变化以及托吡酯(TPM)的干扰作用，探讨PBRs对癫痫敏感性的影响。 方法1.脑细胞亚组分和血小板膜PBRs的增龄改变及DHEA的干扰作用(1)自然衰老实验：SD大鼠(雌性各半)分为乳鼠、3月龄、12月龄和24月龄共4组。动物断头取血制备血小板膜，提取大脑皮质和小脑半球线粒体，制备海马突触体和垂体细胞膜，应用放射配基结合实验测定PBRs结合活力。 (2)衰老模型实验：SD大鼠随机分为对照组、D-半乳糖组、正常用药组、溶媒对照组和药物治疗组。连续注射D-半乳糖制备衰老动物模型。药物治疗的动物同时腹腔注射DHEA，隔日一次，共28次。利用Morris水迷宫测试动物学习记忆能力后，断头制备大脑皮质线粒体和海马突触体，测定PBRs最大结合容量(Bmax)和平衡解离常数(KD)。 2.PBRs对癫痫敏感性的影响及托吡酯的干扰作用 (1)临床观察：抽取37例难治性癫痫患者及50名健康献血者外周静脉血，制备血小板膜，测定PBRs结合活力。 (2)癫痫敏感性实验：雄性大鼠注射惊厥剂量(8mg·kg-1)海人酸(KA)，7d后再次注射KA(4mg·kg-1)后，根据癫痫发作与否分为癫痫敏感性形成组和未形成组。另设单一阈下剂量组和对照组。动物断头后制备大脑皮质线粒体和海马突触体，测定PBRs结合活力。 (3)托吡酯(TPM)干扰实验：雄性大鼠分为对照组、KA点燃组、TPM1组(10mg·kg-1·d-1)和TPM2组(30mg·kg-1·d-1)。动物注射KA(10mg·kg-1)3周末，药物治疗的动物连续注射TPM7d；4周末注射KA(5mg·kg-1)后，观察癫痫发作行为，断头制备海马突触体，测定PBRs结合活力。 结果1.随着鼠龄增加，大脑皮质线粒体、海马突触体、垂体细胞以及血小板PBRs结合活性显著下降。血小板PBRs结合活性与皮质线粒体、海马突触体、垂体细胞PBRs结合活性间均具有显著相关性(P＜0.001)。 2.与溶媒对照组比较，药物治疗组衰老模型动物Bmax显著升高，KD无显著变化，动物学习记忆能力显著改善。大脑皮质线粒体、海马突触体PBRs特异结合活性与迷宫试验动物逃避潜伏期、平台象限游泳距离和时间显著相关(P＜0.001)。 3.难治性癫痫患者组血小板膜PBRs结合活性显著高于健康献血者。 4.癫痫敏感性形成组大脑皮质线粒体、海马突触体PBRs结合活性显著高于其他3组，并且与动物癫痫发作潜伏期、最大强度具有显著相关性。 5.托吡酯(10、30mg·kg-1)可剂量依赖性减弱大鼠癫痫敏感性，降低海马突触体PBRs特异结合量。 结论1.大脑皮质线粒体、海马突触体、脑垂体细胞PBRs结合活性呈现增龄下降改变，血小板PBRs结合活性能够反映上述指标的变化。皮质线粒体、海马突触体PBRs表达量与衰老动物学习记忆功能密切相关。DHEA可以增加脑组织PBRs的表达量，并改善衰老动物智能状态。 2.脑组织PBRs改变与KA点燃大鼠癫痫敏感性形成有关，TPM能够降低KA点燃大鼠癫痫敏感性，机制与降低海马突触体PBRs特异结合量有关。

目录

英文缩略词

前 言

第一部分脑组织和血小板PBRs的增龄改变及脱氢表雄酮的干扰作用

实验一：自然衰老过程中脑细胞亚组分和血小板膜PBRs的变化

实验二：脱氢表雄酮对衰老模型大鼠脑细胞亚组分PBRs的影响

第二部分PBRs对癫痫敏感性的影响及托吡酯的干扰作用

实验一：难治性癫痫患者外周血血小板膜PBRs的变化

实验二：外周型苯二氮卓受体对大鼠癫痫敏感性的影响

实验三：托吡酯对大鼠癫痫敏感性及海马突触体PBRs的影响

总结

参考文献

综述一、外周型苯二氮卓受体在衰老和癫痫中的作用

综述二、托吡酯神经保护作用研究进展

攻读学位期间发表文章和获奖情况

致谢