大黄素和大黄酸通过激活细胞PPARγ促进葡萄糖摄取

摘要

目的：研究中药提取单体成分大黄素(emodin)和大黄酸(rhein)对肝细胞、骨骼肌细胞和脂肪细胞过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptor gamma,PPARγ)的激动作用和葡萄糖摄取作用的影响。 方法：1.C2-C12骨骼肌细胞和3T3-L1脂肪细胞诱导成熟及培养，HepG2肝细胞培养；2．将大黄素和大黄酸与诱导成熟的可用于实验的细胞进行培养，Western杂交法测定PPARγ和葡萄糖转运蛋白(elucose transpon protein,GLUT)的蛋白表达水平；3.测定大黄素和大黄酸作用后的三种细胞对2．脱氧-[<'3>H]-D-葡萄糖摄取率的影响。 结果：1．大黄素作用剂量和时间依赖性地刺激HepG2细胞PPARγ和GLUT-2蛋白的表达水平。其中，PPARγ蛋白水平在90μmol/L和作用24 h刺激作用最强，约为对照组的3.1～3.8倍(P<0.01)；GLUT-2蛋白水平在90μmol/L和作用16 h刺激作用最强，约为对照组的2.5～4.3倍(P<0.01)；HepG2细胞的葡萄糖摄取率在90 μmol/L浓度的大黄素作用24 h后，约为对照组的5倍(P<0.01)。2．大黄酸剂量(20～180μmol/L)和作用时间(8～24 h)依赖性的刺激HepG2细胞PPARγ和GLUT-2蛋白的表达水平。其中，PPARγ蛋白水平在90μmol/L和作用16 h时刺激作用最强，约为对照组的2.8～3.3倍(P<0.01)；GLUT-2蛋白水平在90 μmol/L和作用24 h刺激作用最强，分别为对照组的1.6～4.7倍(P<0.01)；HepG2细胞的葡萄糖摄取率在180 μmol/L浓度的大黄酸作用24 h后分别为对照组的5.7～6.7倍(P<0.00。3．大黄素浓度(40～240 gmol/L)依赖性地刺激C2-C12骨骼肌细胞PPARγ和GLUT-4蛋白的表达水平。其中，PPARγ蛋白水平在160 μmol/L 作用24 h刺激作用最强，为对照组的2.5倍(250±29，t=8.829，P<0.01)；GLUT-4蛋白水平在80μmol/L、作用24 h刺激作用最强，约为对照组的3.2～3.6倍(P<0.01)；C2-C12骨骼肌细胞的葡萄糖摄取率在80 μmol/L浓度的大黄素作用24 h后作用显著，约为对照组的4.9倍[(453.33±47.10)vs(91.67±23.51)，t=11.900，P<0.01]。4．大黄酸浓度(80～240μmol/L)依赖性地刺激C2-C12骨骼肌细胞PPARγ和GLUT-4蛋白的表达水平。其中，PPARγ蛋白水平在160 μmol/L作用24 h刺激作用最强，为对照组的1.6倍(160±16，t=6.495，P<0.01)；GLUT-4蛋白水平在80 μmol/L和作24 h刺激作用最强，约为对照组的1.7～2.2倍(P<0.01)；C2-C12骨骼肌细胞的葡萄糖摄取率在80 μmol/L浓度的大黄酸作用24 h后作用显著，约为对照组的4.7～5.7倍(P<0.01)。5．大黄素浓度(40～240μmol/L)依赖性地刺激3T3-L1细胞PPART和GLUT-4蛋白的表达水平。其中，PPARγ蛋白水平在240 μmol/L作用24 h刺激作用最强，为对照组的3.3倍(330±15,t=26.558，P<0.01)；GLUT-4蛋白水平在160 μmol/L、作用16h刺激作用最强，约为对照组的4.6～5.8倍(P<0.01)；3T3-L1细胞的葡萄糖摄取率在160 μmol/L浓度的大黄素作用24 h后，作用显著，约为对照组的12.4倍[(352.0±24.22)vs28.33，t=23.147，P<0.01]。6．大黄酸浓度(40～240 μmol/L)依赖性地刺激3T3-L1细胞PPARγ和GLUT-4蛋白的表达水平。其中，PPARγ蛋白水平在160 μmol/L作24 h刺激作用最强，为对照组的2.8倍(280±14，t=22.269，P<0.01)；GLUT-4蛋白水平在160 μmol/L、作用24h刺激作用最强，约为对照组的1.7～3.3倍(P<0.01)：3T3-L1细胞的葡萄糖摄取率在160 μmol/L浓度的大黄素作用24 h后，作用显著，约为对照组的9.3～16.0倍。

目录

声明

前 言

第一部分　大黄素和大黄酸对三种细胞PPARγ蛋白表达的影响

第二部分　大黄素和大黄酸对三种细胞葡萄糖转运蛋白的表达及其葡萄糖摄取作用的影响

第三部分　讨 论

第四部分　结 论

第五部分　参考文献

第六部分文献综述：天然药物在糖尿病治疗中的作用及其作用机制研究现状

攻读学位期间发表文章

致 谢