性别与食管静脉曲张破裂出血的关系及雌激素对门脉高压大鼠食管下段粘膜下静脉的影响的研究

摘要

本研究分为三部分： 第一部分：肝硬化食管静脉曲张破裂出血危险因素分析 目的：探讨性别因素在肝硬化食管静脉曲张破裂出血中的统计学意义。 方法：总结1987年4月～2008年1月于解放军总医院消化科住院的肝硬化食管静脉曲张出血患者资料，记录患者年龄和性别。对2006年1月～2008年1月符合纳入条件的病例分析，进行分组。A组：有食管静脉曲张出血病史，但入院前三月未再次出血，病情相对稳定者；B组：食管静脉曲张无出血史患者，然后把A组和B组中按绝经年龄分层，拆分为A1≤(50岁)，A2(＞50岁)，B1≤(50岁)和B2(＞50)岁组。采集患者的年龄、性别、肝功能Child-pugh分级、食管静脉曲张分期、红色征、是否伴有胃静脉曲张、门静脉主干内径、血清总胆红素、白蛋白水平和血小板计数。实验数据采用SPSS13.0 for Windows统计软件进行logistic回归模型分析影响肝硬化患者食管静脉曲张破裂出血的主要因素。 结果：对1987年4月～2008年1月纳入研究的2008例食管静脉曲张出血患者初步调查发现：15岁前男女患者比例为1.11：1；15岁至50岁男女患者比例为5：1；50岁后男女患者比例为2.39：1。将2006年1月～2008年1月符合纳入条件共92例临床资料，进行Logistic回归分析发现红色征和肝功Child-pugh分级对食管静脉曲张出血的影响具有统计学意义(X2=5.146，P=0.023；X2=9.158，P=0.003)。对年龄小于50岁的53例患者进行Logistic回归分析发现性别、红色征和肝功Child-pugh分级对食管静脉曲张出血的影响具有统计学意义(X2=4.163，P=0.041；X2=4.163，P=0.041；X2=6.506，P=0.011；)。对年龄大于50岁的39例患者进行Logistic回归分析发现肝功Child-pugh分级和血小板对食管静脉曲张出血的影响较为显著但不具有统计学意义(X2=3.179，P=0.075；X2=3.229，P=0.072)。 结论：1、肝硬化食管静脉曲张出血患者中性别比例在绝经期前后存在不同。50岁以前男性患者比例明显高于女性；50岁后女性患者比例有所升高，男性患者比例下降。2、肝功能Child-pugh分级是肝硬化食管静脉曲张出血独立危险因素。绝经期前性别和红色征也是食管静脉曲张出血的独立危险因素。 第二部分：雌激素对门脉高压大鼠门静脉压力、食管粘膜下静脉血管形态和血管平滑肌细胞表型的影响 目的：通过门静脉结扎两步法和左侧肾上腺静脉结扎诱导建立SD大鼠门脉高压食管静脉曲张模型，探讨大鼠食管静脉曲张形成过程中雌激素对门静脉压力、食管静脉形态和VSMC细胞表型的影响。 方法：随机挑选80只雌性SD大鼠，分为4组，每组20只。A组，单纯分离门静脉，左侧肾上腺静脉和卵巢不进行结扎；B组，行门静脉结扎两步法和左侧肾上腺静脉结扎；C组，行门静脉结扎两步法和左侧肾上腺静脉结扎加卵巢切除；D组行门静脉结扎两步法和左侧肾上腺静脉结扎加卵巢切除并行雌激素替代疗法。所有动物均正常喂养。门静脉完全结扎术后第1天、3天、7天、15天和30天检测门静脉压力后，处死大鼠，4％多聚甲醛灌流固定，获得食管静脉曲张标本。HE染色观察各组粘膜层血管形态。免疫组织化学法检测对照组和实验组曲张食管静脉α-SMA和Desmin的表达情况。应用Image-Pro-Plus6.0软件检测染色切片的OD值。实验数据采用SPSS13.0 for Windows统计软件进行统计分析。 结果：术后各实验组均出现食管静脉曲张的病理改变。门静脉完全结扎术后第1～30天各实验组大鼠门静脉压力较对照组均明显增高，有统计学意义；实验组间比较无统计学意义。术后第1天，实验组血管数目、血管总截面积及血管平均截面积与对照组比较，无统计学意义；实验组间比较无统计学意义。术后第3、7、15、30天实验组在血管数量、血管总截面积、平均血管截面积方面与对照组相比有统计学意义。术后第3天B组与C组在血管数量方面比较有统计学意义。术后第7、15、30天B组与C组在血管总截面积、平均血管截面积相比有统计学意义。余不同时间点实验组间各相关指标比较均无统计学意义。α-SMA和Desmin在食管下段粘膜下静脉表达情况在术后第1天各实验组与对照组相比均无统计学意义；实验组间比较无统计学意义。术后第15天，各实验组与对照组相比均有统计学意义；实验组间比较无统计学意义。术后第30天，各实验组与对照组相比均有统计学意义；B组与C组、C组与D组比较有统计学意义；B组与D组比较无统计学意义。 结论：1、门静脉结扎两步法加左肾上腺静脉结扎的方法可制备大鼠门脉高压食管静脉曲张的模型。2、食管静脉曲张形成过程中，血管平滑肌细胞出现表型变化，与曲张的血管结构改建有关。3、α-SMA和Desmin表达水平变化与雌激素水平有一定的联系。4、静脉曲张形成后，雌激素能够促进血管成熟，结构稳定，可能与防止出血有关。 第三部分：雌激素和他莫昔芬对体外培养大鼠血管平滑肌细胞雌激素受体α和细胞表型的影响 目的：探讨17β-雌二醇和他莫昔芬对体外培养雌性大鼠ERs和VSMC表型的影响。 方法：体外培养雌性大鼠VSMC。实验分为17β雌二醇E2(1)10-9M、E2(2)10-8M和E2(3)10-7M；TAM(1)10-8M、TAM(2)10-7M和TAM(3)10-6M；TAM10-6M+E2(3)10-7M组；CON组。作用24h提取总RNA，RT-PCR分析ERα和α-SMA mRNA片段相对浓度。 结果： E2(1)、E2(2)和E2(3)组均促进ERα的表达(F=25.139，P＜0.001)，而各浓度的TAM不影响VSMC ERα表达水平，但是10-6TAM可以阻断10-7M的17β-雌二醇促进ERα表达作用。E2(1)、E2(2)和E2(3)组均可促进α-SMA的表达(F=67.017，P＜0.001)。而各浓度TAM不影响VSMCα-SMA的表达，并且10-7M的17β-雌二醇促进α-SMA表达作用可被10-6M的TAM阻断。 结论：1．雌激素可以促进体外培养VSMC由合成型向收缩型转变。2．VSMC表型转化过程是雌激素依赖的，可被TAM阻断。3．雌激素可能通过ERα途径调节VSMC表型转变。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：中英文缩略词表

声明

前 言

第一部分：肝硬化食管静脉曲张破裂出血的危险因素分析

引 言

资料与方法

结 果

讨 论

小 结

参考文献

第二部分：雌激素对门脉高压大鼠食管下段粘膜下静脉血管形态和血管平滑肌细胞表型的影响

引 言

材料和方法

结 果

讨 论

小 结

参考文献

图 片

第三部分雌激素和他莫昔芬对体外培养大鼠平滑肌细胞雌激素受体α和细胞表型的影响

引 言

材料和方法

实验结果

讨 论

小 结

图 片

参考文献

文献综述 食管静脉曲张研究进展

攻读博士期间发表文章情况

致 谢