大鼠缺血性结肠炎使用尿激酶溶栓后组织损伤的比较

摘要

目的： 一、光化学法建立大鼠缺血性结肠炎的模型。 二、尿激酶对缺血性结肠炎的大鼠进行溶栓治疗后，局部形成缺血-再灌注损伤，评估溶栓治疗的效果，分析P-选择素在其中的作用，为临床提供新的诊疗方法。 方法： 一、光化学法建立大鼠缺血性结肠炎模型：静脉注射光敏剂PSD-007后，激光照射近端结肠10分钟。于照射后1小时处死大鼠，评估结肠粘膜组织的损伤指数，并通过病理切片观察镜下组织损伤及血栓形成情况。 二、用尿激酶对缺血性结肠炎的大鼠进行溶栓治疗：缺血后1小时，静脉给予尿激酶(5万U/Kg)，分别在给予尿激酶后0.5、1、3、6、18、24小时处死大鼠。检测再灌注后不同时间点结肠粘膜组织及血中SOD、MDA、MPO及组织损伤指数的变化趋势，分析P-选择素在结肠组织的表达情况。 结果： 一、模型组大鼠激光照射结束后1h，结肠粘膜面出现充血和水肿，未见糜烂及溃疡形成(0.571±0.535，与对照组相比，P＜0.05)．光镜下可见结肠粘膜中有大量中性粒细胞及淋巴细胞浸润，粘膜层及粘膜下层出现水肿、充血及出血，小血管内可见有血栓形成，固有层水肿，易于与粘膜下层分离。10例标本中，9例标本的组织切片均发现小血管血栓形成。而对照组中仅见少量的中性粒细胞及淋巴细胞浸润，未见其它病理改变。 二、结肠组织的损伤指数随着再灌注后时间的不断延长而逐渐加重，I/R24组时6只大鼠出现溃疡(2.857±0.378，与模型组比较P＜0.01)。组织中SOD随再灌注后时间的延长在0.5小时时有明显的升高(609.268±272.187，与模型组比较，P＜0.05)，之后逐渐下降，在I/R3组达到最低，I/R6组SOD活性叉逐渐升高达到一个小高峰，I/R18组又下降至谷底，；I/R4组又呈升高趋势。而血中模型组SOD较开腹组明显降低(9.362±6.593，P＜0.01)．实验组各组血SOD逐渐升高，I/R24组时达到最高(63.096±23.327，与开腹组比较，P＞0.05)。 模型组组织中MDA含量较开腹组稍高(3.439±3.815，P＞0.05)，I/R0.5组MDA含量明显升高(7.309±3.102，与模型组比较，P＜0.05)，之后在I/R01组下降到一个较低的值，在此基础上MDA含量逐渐升高(I/R6组、I/R18组分别为8.100±6.114，8.597±6.688，与模型组比较，均为P＜0.05)。而I/R24组MDA含量又下降至正常(6.203±4.983，与开腹组比较，P＞0.05)。血中MDA含量的变化较组织中的变化幅度小。模型组血中MDA含量明显升高(9.259±3.780，与开腹组比较，P＜0.05)，之后逐渐下降，I/R3组达到最低(6.456±1.044，与模型组比较，P＜0.05)，从I/R6组MDA含量逐渐升高，I/R24组仍明显高于开腹组(9.062±3.648，P＜0.05)。 组织中MPO变化的幅度不是很大。模型组的MPO含量升高(0.199±0.034，与开腹组比较，P＞0.05)，在此基础上，随时间的延长，组织中MPO的含量逐渐升高，至I/R24组达到最高，且从I/R1组组织中MPO含量与模型组比较，P＜0.05。血MPO含量的变化与组织中的不同。模型组中MPO含量明显升高(285.791±51.773，与开腹组比较，P＜0.01)，之后各组呈下降趋势，至I/R24组达到最低(133.024±32.615，与模型组比较P＜0.01，与开腹组比较P＜0.05)。随着再灌注时间的延长，P-选择素表达逐渐增加，I/R1时达到最多(18.429±0.98，与模型纽和开腹组比较P＜0.01)，后随时间逐渐下降，I/R24时达到最低。 LI与结肠粘膜组织MDA、MPO呈正相关，相关系数分别为0.3229、0.6197，分别为P＜0.05，P＜0.01。P-选择素与血SOD活性呈负相关，相关系数为-0.6493，与血MPO含量呈正相关，相关系数为0.5539，均为P＜0.01，P-选择素与其他指标无相关性。 结论： 一、使用光化学法建立的缺血性结肠炎模型，具有操作性好、可重复性强，动物死亡率极低等特点，能再现人类IC的真实表现，为后续研究提供了很好的动物模型。 二、IC溶栓后缺血再灌注损伤的发生氧自由基起重要作用，MDA、MPO与损伤指数呈正相关，并且局部组织MDA、MPO含量的变化可以作为体现疾病发展程度。而P-选择素在缺血再灌注早期介导白细胞的贴壁、粘附，继而引起炎性反应，也可作为疾病发展程度的早期指标。

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文摘

英文文摘

论文说明：缩略词中英文对照表

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前言

第一部分：光化学法建立大鼠缺血性结肠炎的模型

材料和方法

结果

讨论

小结

第二部分大鼠缺血性结肠炎血栓再通后SOD、MDA、MPO及P-选择素水平的变化

材料和方法

结果

讨论

小结

参考文献

P-选择素在肠缺血再灌注损伤中的作用（综述）

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