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红景天有效组分对缺氧缺糖心肌细胞损伤保护作用的研究

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引 言

1、实验材料

2、统计学处理

3、实验方法与结果

结 论

讨 论

参考文献

致 谢

综述 缺氧诱导因子-1低氧调控及在心血管疾病中的表达

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摘要

目的:研究藏药红景天中对缺氧缺糖心肌细胞损伤起保护作用的药效物质基础,并初步探讨其作用机制。 方法:制备红景天水提部位、乙酸乙酯部位及正丁醇部位,采用小鼠常压耐缺氧实验与血清药效学方法,筛选出红景天抗缺氧的有效部位;进一步提取乙酸乙酯及正丁醇部位单体成分红景天苷、酪醇、没食子酸、德钦红景天苷、草质素-7-O-(3’-β-D-葡萄糖)-α-L-鼠李糖苷、×××(未定名)共6个成分,用依次稀释法,直接作用于缺氧缺糖心肌细胞,测定其细胞活力MTT值及细胞培养上清液中LDH值与细胞中MDA值的变化,筛选出其抗缺氧的有效单体成分;运用45Ca跨膜内流测量技术,检测红景天抗缺氧有效成分对钙内流的影响;采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测在不同药物作用下心肌细胞HIF-1αmRNA表达的变化;采用原位末端脱氧核苷酸转移酶标记TUNEL法,测定不同药物对细胞凋亡的影响。 结果:红景天乙酸乙酯部位和正丁醇部位有促进常压小鼠耐缺氧能力及提高缺氧缺糖心肌细胞活力作用;红景天苷、酪醇、没食子酸、德钦红景天苷、草质素-7-O-(3"-β-D-葡萄糖)-α-L-鼠李糖苷均有不同程度的促细胞活力及减少LDA、MDA水平;而此5个单体成分也有较明显的钙拮抗作用;红景天苷、酪醇都有较明显的增加HIF-1αmRNA表达及抑制细胞凋亡作用。 结论:红景天中对缺氧缺糖心肌细胞起保护作用的有效部位为乙酸乙酯部位及正丁醇部位;有效成分为乙酸乙酯部位的酪醇、没食子酸、德钦红景天苷,正丁醇部位红景天苷、草质素-7-O-(3"-β-D-葡萄糖)-α-L-鼠李糖苷;红景天抗缺氧的作用机制可能与钙拮抗、增强HIF-1αmRNA表达及抑制细胞凋亡有关。

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