从肺病模型大鼠病理改变及相关活性物质SP、VIP、iNOS含量变化探讨“肺病及肠”病理传变机制

摘要

目的：
　　通过观察肺病模型大鼠的一般行为表现，并选取三个不同时间点动态观察其肺与胃肠组织病理生理学、病理形态学改变，以及相关活性物质SP、VIP、iNOS的表达与关联，探索“肺病及肠”的病理传变机制。
　　方法：
　　选取SD大鼠60只，SPF级，雄性。随机分成2组:空白对照组24只，模型组36只。空白组大鼠在无烟环境中饲养，模型组大鼠采用单纯烟熏法造模，每次烟熏50min，每天3次（分别在早上9点、下午2点和6点），共烟熏70d。造模结束后检测大鼠肺功能、胃肠功能等病理生理指标，用光镜观察肺、胃、十二指肠、空肠、回肠、结肠、直肠组织HE染色切片，电镜观察肺与结肠组织超微结构等病理形态学改变，免疫组化法检测肺、结肠组织SP、VIP、iNOS的表达。
　　结果：
　　1.病理生理学
　　大鼠体重:空白组大鼠体重自然增长，模型组大鼠体重增长缓慢。模型组第20天、第50天、第70天分别较空白组有显著性差异(P＜0.01)。在模型组间，第50天和第70天分别较第20天有差异(P＜0.05)或显著性差异（P＜0.01）。
　　肺功能检测:与空白对照组相比，模型组大鼠呼吸频率加快、潮气量和每分钟通气量降低，较空白组有差异(P＜0.05)或显著性差异(P＜0.01)。与造模第20天比较，模型组大鼠造模第50天和第70天潮气量、每分钟通气量降低，有显著性差异(P＜0.01)。
　　胃肠功能检测:与空白对照组相比，模型组大鼠造模第50天、第70天粪便含水率降低，有显著性差异(P＜0.01);第20天、第50天和第70天胃内残留率增高、小肠推进率降低，有显著性差异(P＜0.01)。与造模第20天比较，模型组大鼠造模第50天和第70天粪便含水率降低、胃内残留率增高、小肠推进率降低，有差异(P＜0.05)或显著性差异(P＜0.01)。与造模第50天比较，模型组大鼠造模第70天粪便含水率降低、胃内残留率增高、小肠推进率降低，有差异(P＜0.05)或显著性差异(P＜0.01)。
　　2.病理形态学
　　光镜:模型组大鼠造模第20天、第50天、第70天肺组织可见不同程度支气管上皮细胞变性、坏死，炎细胞浸润;结肠组织出现不同程度肠黏膜及黏膜下大量炎性细胞浸润，灶性壁附上皮细胞变性、坏死、炎细胞浸润，多小灶性及片状糜烂，残存上皮细胞等病理改变;大鼠胃、十二指肠、空肠、回肠、直肠组织病理切片均未发现明显改变。
　　电镜:模型组大鼠造模第20天Ⅰ型肺泡上皮细胞结构破坏，大鼠结肠组织细胞器无明显变化;第50天肺毛细血管管壁增厚，肺泡上皮细胞内出现大量吞噬空泡，结肠组织部分肠黏膜微绒毛消失、线粒体肿胀、细胞核损害;第70天肺间质细胞成分减少，血管内皮细胞肿胀，胞腔塌陷，细胞核扩张，线粒体肿胀明显、嵴消失，Ⅱ型肺泡上皮细胞微绒毛脱落，内质网肿胀，肠粘膜微绒毛排列稀疏紊乱，黏膜下固有层间隙胶原纤维增生、见成纤维母细胞。
　　3.神经肽物质含量变化
　　与空白对照组比较，模型组大鼠第20天、第50天、第70天肺组织SP、VIP、iNOS表达均升高，有差异(P＜0.05);第20天、第50天、第70天结肠组织SP、iNOS表达增高，VIP表达降低，有差异(P＜0.05)。
　　在模型组间，大鼠肺组织SP、VIP、iNOS表达随着造模时间延长而升高(P＜0.05或P＜0.01)。与造模第20天比较，第50天、第70天有差异(P＜0.05)或显著性差异(P＜0.01)。与造模第50天比较，第70天有差异(P＜0.05)或显著性差异(P＜0.01);大鼠结肠组织SP、VIP、iNOS表达也随着造模时间增加而升高(P＜0.05或P＜0.01)，与造模第20天比较，第50天、第70天有差异(P＜0.05)或显著性差异(P＜0.01)。与造模第50天比较，第70天有差异(P＜0.05)或显著性差异(P＜0.01)。
　　结论：
　　1.肺病大鼠出现了胃肠功能的紊乱，提示“肺”病可以影响到“肠”。
　　2.肺病大鼠可出现“大肠”的病理损害，“肺病及肠”的主要部位在结肠。
　　3.初步发现SP、VIP、iNOS等神经肽物质在肺、肠间存在着相关趋势，可能是“肺病及肠”传变的物质基础之一。
　　4.在本模型下，肺病传变到“肠”的时间节点在造模第50天。

目录

摘要

英文缩略词对照表

前言

第一部分 文献研究

1 中医学对“肺与大肠相表里”理论的认识

1．1 中医学对“肺”与“大肠”生理关系的认识

1．2 中医学对“肺”与“大肠”病理关系的认识

1．3 “肺与大肠相表里”理论的临床应用

2 西医学对“肺与大肠相表里”理论的现代研究

2．1 西医学对“肺与大肠相表里”机理的认识

2．2 西医学关于“肺与大肠相表里"的实验研究

第二部分 实验研究

1 实验材料

1．1 实验动物

1．2 实验药物及试剂

1．3 主要仪器及设备

2 实验方法

2．1 动物分组

2．2 慢性支气管炎模型的建立

2．3 大鼠一般行为表现观察方法

2．4 肺功能检测方法

2．5 胃肠功能检测方法

2．6 肺、胃、十二指肠、空肠、回肠、结肠、直肠组织病理学改变观察方法

2．7 免疫组化检测方法

3 统计方法

4 实验结果

4．1 一般行为表现观察结果

4．2 肺功能检测结果

4．3 胃肠功能检测结果

4．4 病理形态学观察结果

4．5 神经肽物质表达结果

5 讨论

5．1 肺病模型大鼠的建立和评价

5．2 SP与“肺”、“大肠”的关系

5．3 VIP与“肺”、“大肠”的关系

5．4 iNOS与“肺”、“大肠”的关系

6 结论

7 存在的问题和展望

7．1 肺病模型观察时间点的选取

7．2 关于“肺病及肠”的特异性

7．3 观察指标的选择

参考文献

附图

1 光镜

2 电镜

3 免疫组化

致谢

在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果

声明