基于多靶点策略的抗阿尔兹海默病新化合物DZH的作用及机制研究

摘要

目的：评价化合物DZH多靶点作用。
　　方法：1、抗氧化、胆碱酯酶抑制作用及雌激素样作用的测定
　　通过研究化合物DZH体外一氧化氮清除能力、铁离子还原能力。同时还考察DZH体内抗急性亚硝酸钠中毒以及对幼年小鼠子宫的影响，以确定化合物DZH抗氧化以及雌激素样作用。同时还考察了DZH体内对胆碱酯酶抑制作用的选择性。
　　2、对单因素致记忆障碍模型的影响
　　腹腔注射氢溴酸东莨菪碱3 mg/kg致小鼠记忆获得障碍，灌胃40％乙醇0.01 mL/g致小鼠记忆再现障碍，小鼠海马内注射凝聚态Aβ1-422μg/只，造模次日进行分组并开始给药，每天一次，连续4周，并进行Morris水迷宫以及生化指标检测，电子显微镜观察海马区神经元超微结构。
　　3、对复合因素致智力缺陷模型的影响
　　（1）雌性小鼠去势后30天，海马内注射Aβ1-42和IBO（2μg Aβ1-42,1μg IBO），次日将造模小鼠随机分组给药，每天灌胃一次，连续4周，并进行跳台、Morris水迷宫以及生化指标的检测。
　　（2）雌性SD大鼠去势后第五周，开始神经毒性造模（4μg Aβ1-42,1μg IBO），Aβ和IBO造模次日进行分组并开始给药，持续5周,并进行用Morris水迷宫、Y迷宫实验，电镜观察大鼠海马区神经元细胞超微结构。并用western blotting方法检测脑组织的iNOS蛋白表达。
　　结果：
　　1、化合物DZH具有抗氧化、胆碱酯酶抑制以及雌激素样作用
　　化合物DZH清除 NO的IC50为356.79μM，铁离子还原能力的的IC50为126.69μM，明显延长亚硝酸钠小鼠的存活时间（P<0.05）；明显抑制脑内乙酰胆碱酯酶的活性，增加幼年小鼠的子宫重量。
　　2、化合物DZH改善单因素致记忆障碍作用
　　小鼠在腹腔注射东莨菪碱后，其在跳台实验的潜伏期明显缩短，错误次数明显增加(P<0.05)。灌胃乙醇的小鼠在跳台实验的潜伏期明显缩短，错误次数明显增加（P<0.05)。而化合物DZH可以明显改善东莨菪碱或乙醇导致的小鼠学习记忆能力损伤。Aβ小鼠在Morris水迷宫实验中找到逃逸平台的潜伏期明显延长，进入有效区域的次数明显减少，其脑组织的ACh、ChAT水平，SOD活性明显降低，其AChE，MDA、NO水平明显升高（P<0.05或P<0.01），电镜观察结果显示：Aβ小鼠海马区出现明显的病理改变。而化合物DZH可以明显改善上述指标。
　　3、化合物DZH防治复合因素致智力缺陷模型作用
　　（1）去势雌性小鼠海马内注射Aβ1-42和鹅膏蕈氨酸混合液可使小鼠在跳台实验中的潜伏期明显缩短，错误次数明显增多，在Morris水迷宫实验中的潜伏期明显缩短，其进入逃逸平台的次数、在有效区域内运动距离以及在逃逸平台上滞留时间明显减少，并且其脑组织中的ACh含量、SOD活性明显降低，AChE、MDA活性显著增加（P<0.01或P<0.05）。化合物DZH9mg/kg,3 mg/kg组可以显著改善智力缺陷小鼠的学习记忆能力（P<0.01或P<0.05），明显对抗其生化指标的改变。
　　（2）去势雌性SD大鼠双侧脑海马内注射Aβ1-42和鹅膏蕈氨酸混合液可使其在水迷宫实验中的潜伏期明显缩短，其有效区域进入次数、在有效区域内运动的距离及时间，进入逃逸平台的次数以及在逃逸平台上滞留的时间均明显减少，在Y迷宫实验中学习的正确率和记忆正确率明显降低（P<0.01或P<0.05），其海马出现明显的病理改变。而化合物DZH6 mg/kg，2 mg/kg可以改善智力缺陷大鼠在水迷宫实验及Y迷宫实验中的学习记忆能力（P<0.01或P<0.05）以及海马病理改变。
　　结论：化合物DZH可以改善智力缺陷模型动物的学习记忆能力，其机制可能与其具有抗氧化作用、抑制胆碱酯酶活性、雌激素样作用、抗Aβ毒性作用等多靶点作用有关。

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缩略词表

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引言

第一部分 化合物DZH抗氧化、胆碱酯酶抑制作用及雌激素样作用的测定

1 实验材料

2 方法

3 结果

4 讨论

第二部分 化合物DZH对单因素致记忆障碍模型小鼠的影响

1 实验材料

2 实验方法

3 结果

4 讨论

第三部分 化合物DZH对复合因素致智力缺陷模型动物的影响

1.实验材料

2．实验方法

3 实验结果

4 讨论

结论

参考文献

附图

致谢

综述:β淀粉样蛋白（Aβ）与阿尔兹海默病

在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果

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