三才连梅颗粒毒性研究与临床疗效评价

摘要

目的：
　　总结分析中药复方在治疗2型糖尿病（T2DM）及其相关疾病中运用的常用治法、常见中成药等内容；科学研究三才连梅颗粒质量控制、药物安全、毒性研究及安全性评价等问题；综合评价三才连梅颗粒治疗 T2DM的临床疗效及安全性，为中药复方制剂的临床运用提供充分合理、科学严谨的理论和实践依据。
　　方法：
　　1、采用系统综述的方法，通过系统评价研究，综合分析、归纳总结复方中药在治疗T2DM及其相关疾病中运用的常用治法、常见中成药等相关文献。探讨治疗常见及多发疾病的特色及优势。
　　2、采用高效液相色谱法（HPLC），通过检测三才连梅颗粒的主体成分小檗碱的含量，探讨中药复方制剂的生产必备的质量标准；采用体内外毒性实验的研究方法，观察三才连梅颗粒药物干预后在体/离体的毒性反应及安全性药理反应，探讨中药复方制剂的安全性应用。
　　3、采用RCT临床研究方法，对比观察血糖、血脂、体重、胰岛β细胞功能及中医证候积分等疗效评价指标的差异性变化。分别于干预后4周、8周、12周评价临床疗效及安全性。
　　结果：
　　1、中药复方常用治法、常见中成药治疗T2DM及其相关疾病的临床疗效研究结果
　　健脾法基础上的联合干预，降低 FPG优于对照组。其中活血化瘀、滋阴健脾法较明显（p<0.05）；降低2hPG优于对照组，其中温阳健脾法较为突出（p<0.01）；活血化瘀、滋阴健脾法降低HbA1C优于对照组；在提高总有效率方面优于对照组（p<0.05）。
　　抑木扶土法联合干预，降低HbA1c、改善中医证候评分优于对照组（p<0.05）；但在改善HAMD及SDS评分方面，异质性较大（p<0.05）。
　　津力达颗粒联合干预，降低FPG优于对照组（p<0.05），其结果与疗效周期无关；改善 FINS与对照组（疗程>3个月）比较，存在明显差异（p<0.01）；改善HOMA-IR优于对照组（p<0.05），但疗程≤3个月时，存在明显差异（p<0.01）；提高总有效率优于对照组，其与疗效周期暂无关联。
　　糖脉康干预T2DM患者（3个月疗程）FPG，2hPG和HbA1c较对照组降低突出（p<0.05），但疗程为2个月时，统计学异质性明显（p<0.05）。
　　2、三才连梅颗粒的质量标准及安全评价研究结果
　　三才连梅颗粒含药血清对 HepG2细胞的影响，结果显示，对细胞的生长无明显影响；Edu染色检验其对增殖未见明显影响；CFSE/PI双染色检验未明显引起凋亡；过氧化氢实验检测三才连梅颗粒含药血清对细胞过氧化氢的影响，结果表明，细胞中ROS的产量无明显变化。
　　三才连梅颗粒急性毒性实验，结果提示：小鼠三才连梅颗粒灌胃给药的LD50为38.73g生药/kg，95%可信限为34.66~43.28g生药/kg。
　　大鼠长期毒性实验，结果显示：三才连梅颗粒高剂量组雄性大鼠体重均有减少，给药前期尤为明显，与空白对照组比较（p<0.05）；实验初始阶段，动物自主活动减少（特别是高剂量组雄性动物），大约4周以后基本恢复正常；其余各项检测（血液各指标、脏器及病理学）均未见病变，未见毒性发生。
　　三才连梅颗粒经口给予犬进行心血管、呼吸及中枢神经系统的研究，结果显示：对犬血压、心率、心律、ECG各个间期等，呼吸活动及自主行为均无作用。实验表明三才连梅颗粒0.955g/kg、1.45g/kg和1.91g/kg（相当于临床剂量的1.91、2.9、3.82倍）给药对犬各个系统均未见明显影响。
　　3、三才连梅颗粒治疗T2DM的疗效评价研究结果
　　治疗后，对照组平均体重水平下降了1.7kg（p>0.05）。治疗组患者 TG由2.09mmol/L下降至1.68mmol/L（p<0.05），与对照组比较存在差异（p<0.05），体重平均下降了1.3kg（p>0.05）；两组TC、HDL-C、LDL-C比较无差异（p>0.05）；两组体重均有一定程度降低，但组内和组间比较无差异（p>0.05）。
　　治疗后，两组 OGTT中血糖、胰岛素释放试验中胰岛素均有明显变化，治疗组患者OGTT前3个时间点血糖显著下降（p<0.01），3小时血糖变化与基线比较，明显下降（p<0.05）；除0h外，另外3个时间点胰岛素水平变化显著，尤其是1小时和3小时，与对照组组比较存在差异（p<0.01或p<0.05）。对照组患者前2个时间点和3小时血糖水平及胰岛素值存在差异（p<0.05）。此外，治疗组患者HOMA-β显著下降（p<0.01）；两组患者HOMA-IR及ISI变化存在差异（p<0.05）；两组组间比较无差异（p>0.05）。
　　治疗后两组积分分别下降22.40分、12.62分（p<0.01）；前者中医证候积分优于后者（p<0.01）；两组疗效比较存在差异（Z=-2.605，p=0.009）。
　　治疗期间，两组无严重不良反应事件发生，与基线组比较，两组患者肝肾功能及其他安全指标无差异（p>0.05）。
　　结论：
　　1、中药复方常用治法、常见中成药治疗T2DM及其相关疾病的临床疗效研究结论
　　(1)中药复方常用治法、常见中成药临床疗效的系统评价整体结果分析不理想，存在夸大疗效的可能性，暂无相关充足条件证实中医药单一治疗的优势，仅仅表明联合/辅助治疗对T2DM及其相关疾病的干预效果。
　　(2)健脾法（包括疏肝健脾、温阳健脾、补肾健脾法等）联合治疗时治疗组及对照组存在疗程差异性。
　　(3)抑木扶土法联合治疗时部分结果的异质性过大。
　　(4)津力达颗粒联合治疗时存在结果与疗程长短的明显相关性（疗程>3个月/≤3个月）及其促分泌或改善IR作用机制尚未可知。
　　(5)糖脉康联合干预存在HbA1c的迟缓性表现。
　　2、三才连梅颗粒的质量标准及安全评价研究结论
　　1、HPLC结果证实，中药复方制剂三才连梅颗粒中主体成分小檗碱含量确定，检测结果准确、灵敏，定量准确。
　　2、体内外动物毒性实验结果证实，中药复方制剂三才连梅颗粒未见明显毒性，安全可靠。
　　3、安全药理研究结果证实，中药复方制剂三才连梅颗粒对犬心血管、呼吸及中枢神经均无明显影响。
　　3、三才连梅颗粒治疗T2DM的疗效评价研究结论
　　(1)两组药物治疗T2DM均有一定的疗效。
　　(2)三才连梅颗粒在控制血糖及HbA1c方面与二甲双胍相比，具有一定的优势；
　　(3)在降低TG方面，疗效优于二甲双胍；
　　(4)在改善β细胞功能和IR方面，具有一定的优势；
　　(5)在改善T2DM阴虚热盛证症状方面，疗效优于二甲双胍；
　　(6)治疗期间三才连梅颗粒无严重不良反应事件发生。

目录

中英文缩略词表

引言

1. 选题背景

2. 研究内容

3. 技术路线

第一部分 基于循证评价的中药复方常用治法、常见中成药的临床疗效研究

1. 资料与方法

2. 资料提取与质量评价

3. 统计学方法

4. 结果

第一部分研究流程图：

讨论

结论

参考文献

第二部分 三才连梅颗粒的质量控制及安全性评价研究

1) 三才连梅颗粒质量控制研究

2) 三才连梅颗粒含药血清对HepG2细胞的毒性研究

3) 三才连梅颗粒急性毒性实验

3) 结果

4) 三才连梅颗粒长期毒性实验

5) 三才连梅颗粒安全药理实验

第二部分研究流程图：

讨论

结论

参考文献

第三部分 三才连梅颗粒干预T2DM的临床疗效评价

1. 对象与方法

2. 结果

第三部分流程图：

讨论

结论

参考文献

问题与展望

本研究的不足之处

未来研究工作的展望

致谢

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