电化学石英晶体微天平在DNA研究中的应用

摘要

本论文利用电化学石英晶体微天平(EQCM)检测技术对DNA的序列特异性识别、定点切断及EQCM检测DNA灵敏度的提高进行了研究.本文首先以20个碱基长短的DNA片断为研究对象,运用自组装膜法(SAM)将其在EQCM金电极上的固定进行了研究,并对其分别与10个碱基的DNA片断和8个碱基的DNA片断的特异性识别进行了研究.借助金纳米粒子在EQCM金电极上的组装,提高了EQCM对DNA检测的灵敏度,并在此基础上进一步研究了DNA的错配碱基个数和错配位点对杂交的影响.为了进一步提高EQCM对DNA检测的灵敏度,我们设计了分子信标型DNA(即将分子信标两端的荧光分子和猝灭分子去除,一端用一条巯基碳链代替),将其作为探针,首次将其修饰在了EQCM金电极表面,并与电位控制技术相结合,对DNA的单碱基错配进行了研究.

目录

第一章、文献综述

一、研究意义

二、研究进展

1、识别系统——DNA的固定

2、识别过程及结果检测——DNA检测

3、研究方法

四、本论文的研究目的和内容

五、研究展望

第二章、DNA杂交及切断过程的EQCM研究

1、实验部分

2、实验结果和讨论

2.1单链DNA的固定

2.2单链DNA的杂交

2.3Ce(IV)对单链DNA的切断

3、结论

第三章、基于金纳米粒子的EQCM实时检测DNA错配的研究

1、实验部分

2、实验结果和讨论

2.1纳米粒子的表征

2.2双硫醇自组装的电化学表征

2.3金纳米粒子自组装的AFM表征

2.4探针DNA在EQCM金电极上的固定

2.5DNA杂交、错配的EQCM实时检测

2.6DNA杂交时间的电泳实验研究

2.7ST与dsDNA作用的荧光光谱研究

3、结论

第四章、分子信标型DNA的单碱基错配的EQCM研究

一、实验部分

二、结果和讨论

2.1分子信标型探针DNA在EQCM金电极上的固定

2.2不同电压下DNA杂交的EQCM检测

2.3恒压(-0.1V)下DNA杂交和单碱基错配的EQCM检测

2.4分子信标型探针DNA杂交和错配的电化学表征

三、结论

参考文献

致谢

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