左旋甲硫氨酸限制对机体免疫功能影响及其在胃癌靶向化疗中的意义

摘要

甲硫氨酸(Met)依赖性是肿瘤代谢缺陷的重要特征之一。近年来，从分子水平对肿瘤细胞的Met依赖性进行一系列研究，发现了Met代谢的关键酶功能异常(如Met合成酶单核苷酸多态性，甲基硫腺苷磷酸酶基因缺失，胸苷合成酶蛋白表达下降，甲叉四氢叶酸还原酶基因表达上调)。细胞内信号转导障碍是Met限制导致肿瘤细胞凋亡的另一分子机制。 目的:研究左旋甲硫氨酸(L-Met)限制对免疫功能和营养状况的影响及其在胃癌靶向化疗中的意义。 方法:通过体外细胞培养和体内研究的方法，首先观察含(L—Met<'+>)或不含L-Met(Met<'->、Hcy<'+>Met<'->、D-Met<'+>)的培养液对小鼠脾淋巴细胞免疫功能的影响；其次观察摄入含或限制Hcy<'+>Met<'->、D-Met<'+>的特殊饲料对免疫功能和营养状况的影响；再观察在摄入含或限制L-Met饲料的基础上，联合或不联合Alimta化疗对小鼠胃癌生长的影响。最后观察人消化道肿瘤细胞株和胃癌组织MTAP基因表达水平，以及L—Met限制、A1imta化疗、L-Met限制联合Alimta化疗对MTAP基因缺失的胃癌细胞株转染MJAP前后的不同疗效。 结果:小鼠脾淋巴细胞在Met<'->培养液中无法存活。Hcy<'+>Met<'->培养液组及D一Met<'+>培养液组中的淋巴细胞活性，PHA刺激的淋巴细胞增殖、活化和分泌IL-2功能，LPS刺激的单核／巨噬细胞分泌TNF-α功能与L—Met<'+>培养液组比较都无差异(P>0.05)。与摄入L-Met<'+>饲料4周组相比，Hcy<’+>Met<’->饲料组淋巴细胞增殖能力和相对体重下降(P<0.05)；而淋巴细胞亚群分布、NK细胞杀伤功能、致敏T细胞杀伤功能和诱导Thl/Th2平衡向Thl型漂移能力、血浆白蛋白水平差别无统计学意义(P>0.05)。D-Met<’+>饲料组上述各项免疫学和营养学指标与L-Met<’+>饲料组无差异(P>0.05)。Hcy<’+>Met<’->饲料组和D-Met<’+>饲料组抑制胃癌效果类似，抑瘤率(％)分别为39.83±5.41和44.15±14.73(P>0.05)。Hcy<’+>Met<’->饲料联合Alimta化疗组、D-Met<’+>饲料联合Alimta化疗组抑瘤率均显著高于相应单纯L-Met限制组(48.67％±1.85％，P<0.05：56.05％±3.30％，P<0.05)。胃癌细胞株SNU-16、肝癌细胞株QGY-7703和16％的胃癌组织中存在MTAP基因缺失现象。SNU-16细胞在D-Met<’+>培养液中的增殖抑制率显著高于转染MTAP的SNU-16/MTAP细胞(P<0.05)。Alimta对SNU-16细胞的IC50值显著低于转染的SNU-16/MTAP细胞(P<0.05)。在D-Met<’+>培养液中，转染的SNU-16/MTAP细胞与SNU-16细胞的AlimtaIC50比值显著高于在L-Met<’+>培养液中的相应值，分别为17.21±3.22和9.78±1.43(P<0.05)。 结论:L-Met限制的体外培养环境不影响小鼠淋巴细胞免疫功能。摄入Hcy<’+>Met<’->饲料4周可引起小鼠淋巴细胞增殖功能和相对体重下降，但不影响对肿瘤细胞的免疫效应和总体营养状况。摄入D-Met<’+>饲料4周不影响小鼠免疫功能和营养状况。摄入Hcy<’+>Met<’->饲料和D-Met<’+>饲料都可抑制小鼠胃癌生长，与Alimta联合化疗具有协同作用。人胃癌细胞株和胃癌组织中存在．MTAP基因缺失现象，D-Met+环境和A1imta联合化疗可用于：MTAP基因缺失的胃癌靶向治疗。

目录

文摘

英文文摘

上海交通大学学位论文原创性声明及版权使用授权书

中英文对照缩写表

前言

第一部分左旋甲硫氨酸限制的体外培养环境对小鼠免疫功能的影响

第二部分限制左旋甲硫氨酸摄入对小鼠免疫功能和胃癌细胞增殖的影响

第三部分左旋甲硫氨酸限制联合Alimta治疗MTAP基因缺失的胃癌细胞体外研究

结论和展望

参考文献

致谢

攻读学位期间发表的学术论文目录