普伐他汀干预p38 MAPK、IFN-gamma/STAT1、IL-6/STAT3信号传导通路预防动脉粥样硬化的实验研究

摘要

[目的和意义]： 本研究旨在观察普伐他汀在预防动脉粥样硬化(atherosclerosis，AS)形成过程中对p38MAPK、IFN-gamma(γ)/STAT1及IL-6/STAT3信号传导通路的影响，研究结果将为普伐他汀干预动脉粥样硬化提供新的途径，为防治动脉粥样硬化提供更有临床价值的信息。 [实验方法]： 1.采用含1.25％(wt/wt)胆固醇的饲料喂养8周龄apoE-1-小鼠诱导AS模型，同时普伐他汀灌胃(80mgkg-1)干预，8周后，处死小鼠，收集血清，分离主动脉，根部用于组织形态学分析，胸腹主动脉用于mRNA和蛋白分析。 2、采用生化法测定血清内TC和LDL-C变化。 3、主动脉根用做石蜡切片，HE染色后，检测AS的面积和炎症反应程度。 4、real-timePCR法检测胸腹主动脉内IFN-γ和TNF-α的mRNA水平。 5、采用酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测血清内IL-6、IFN～-γ、TNF-α和OX-LDL含量，以及胸腹主动脉内IL-6、IFN-γ、TNF-α的含量。 6、检测胸腹主动脉内MDA和GSH的含量，检测胸腹主动脉SOD、GSH-Px、CAT、GST的活性。 7、采用Western-Blot法检测胸腹主动脉内3-nitrotyrosine、iNOS、p38MAPK、p-p38-MAPK、p53、STAT1、pSTAT1、STAT3、pSTAT3、IRF-1、SOCS1蛋白表达的水平。 [结果]： 1、动脉粥样硬化小鼠AS病变的相对面积(30.84％)显著高于空白对照组(4.62％)(P＜0.05)，普伐他汀干预小鼠AS病变的相对面积(7.91％)显著低于动脉粥样硬化小鼠(P＜0.05)。 2、动脉粥样硬化小鼠血清内TC(26.59±7.25mmol/L)和LDL-C(21.76±6.29mmol/L)的含量显著升高(P＜0.05)，普伐他汀干预后血清内TC(21.62±12.78mmol/L)和LDL-C(17.45±11.08mmol/L)的含量与动脉粥样硬化小鼠比较差异无统计学意义。 3、动脉粥样硬化小鼠血清内氧化产物ox-LDL和炎症因子IL-6、IFN-γ、TNF-α的含量显著升高(P＜0.01)，普伐他汀可显著逐渐减少小鼠血清内ox-LDL(P＜0.05)和IL-6(P＜0.01)、IFN-γ(P＜0.01)、TNF-α(P＜0.01)的含量。 4、动脉粥样硬化小鼠主动脉AS病变内IFN-γ和TNF-α的mRNA水平显著升高(P＜0.05)，普伐他汀干预后可显著降低主动脉内IFN-γ和TNFα的mRNA水平(P＜0.05)。 5、动脉粥样硬化小鼠主动脉内IL-6、IFN-γ、TNF-α的含量显著升高(P＜0.01)，普伐他汀可显著降低主动脉内IL-6(P＜0.01)、IFN-γ(P＜0.01)、TNF-α(P＜0.05)的含量。 6、动脉粥样硬化小鼠主动脉内MDA的含量显著增加(P＜0.01)，GSH含量和SOD、CAT、GST、GSH-Px的活性显著降低(P＜0.01)，普伐他汀干预后可显著降低主动脉内MDA的含量(P＜0.01)，显著增加GSH含量(P＜0.01)和SOD(P＜0.01)、CAT(P＜0.01)、GST(P＜0.01)、GSH-Px(P＜0.05)的活性。 6、动脉粥样硬化小鼠主动脉内3-nitrotyrosine、iNOS的表达显著增加，普伐他汀干预后可显著减少主动脉内3-nitrotyrosine、iNOS的表达。 7、动脉粥样硬化小鼠氧化应激诱导的p38MAPK信号通路的活性因子p-p38MAPK及该通路的下游因子p53的表达显著增加，普伐他汀干预后可显著降低主动脉内p-p38MAPK及p53的表达。 8、动脉粥样硬化小鼠主动脉内IFN-γ/STAT1和IL-6/STAT3信号传导通路的活性因子pSTAT1和pSTAT3的表达增加，普伐他汀干预后显著降低主动脉内pSTAT1和pSTAT3的表达。 9、动脉粥样硬化小鼠主动脉内IFN-γ/STAT1和IL-6/STAT3信号传导通路的抑制因子SOCS1的表达显著降低，普伐他汀干预后显著增强主动脉SOCS1的表达。 [结论]： 1、普伐他汀可预防高胆固醇饮食诱导的apoE-1-小鼠AS。 2、AS时血清胆固醇含量增高，普伐他汀没有降低apoE-1-小鼠血清胆固醇的作用，普伐他汀预防apoE-1-小鼠AS的效应不依赖其降胆固醇作用。 3、AS时氧化还原系统失平衡和炎症反应增强，普伐他汀通过减轻氧化应激、硝基化应激、炎症反应预防AS。 4、AS时p38MAPK信号传导通路可被激活，普伐他汀有通过调节p38MAPK信号传导通路预防AS的作用。 5、AS时IFN-γ/STAT1信号传导通路可被激活，普伐他汀有调节IFN-γ/STAT1信号传导通路预防AS的作用。 6、AS时IL-6/STAT3信号传导通路可被激活，普伐他汀有调节IL-6/STAT3信号传导通路预防AS的作用。

目录

文摘

英文文摘

论文说明:缩略词表

声明

前言

第一部分apoE-/-小鼠动脉粥样硬化动物模型的建立及普伐他汀干预作用

引言

一、材料

二、仪器

二、方法

四、结果

五、讨论

参考文献

附图

第二部分普伐他汀抑制apoE-/-小鼠动脉粥样硬化氧化应激和预防动脉粥样硬化与调控p38MAPK信号传导通路有关

第一节普伐他汀干预apoE-/-小鼠动脉粥样硬化氧化应激的作用

引言

一、材料

二、仪嚣

三、方法

四、结果

五、讨论

参考文献

附图

第二节普伐他汀预防动脉粥样硬化的抗氧化效应与p38MAPK信号传导通路的干预作用

引言

一、材料

二、仪嚣

三、方法

四、结果

五、讨论

参考文献

附图

第三部分apoE-/-小鼠动脉粥样硬化的炎症反应与IFN-gamma/STAT1和IL-6/STAT3信号通路的表达以及普伐他汀的干预作用

第一节apoE-/-小鼠动脉粥样硬化的炎症反应与IFN-gamma/STAT1信号通路及普伐他汀的干预效果

引言

一、材料

二、仪器

三、方法

四、结果

五、讨论

参考文献

附图

第二节apoE-/-小鼠动脉粥样硬化的炎症反应与IL-6/STAT3信号通路以及普伐他汀的干预效果

引言

一、材料

二、仪器

三、方法

四、结果

五、讨论

参考文献

附图

结论

致谢

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