nm23-h1基因过表达对口腔鳞癌细胞影响的体外研究

摘要

目的：探讨nm23-h1基因对口腔鳞癌细胞增殖、侵袭等生物学行为的影响及可能的作用机制。 方法：检测6个口腔鳞癌细胞系中nm23-h1的表达水平；挑选nm23-h1表达量最少、报告基因质粒转染效率最高的细胞系，瞬时转染pCMV-nm23-h1质粒，检测转染后细胞的生物学特性：MTT法检测细胞增殖活性、平板克隆形成实验检测克隆形成能力、流式细胞仪检测细胞周期、粘附实验检测细胞粘附能力、小室侵袭实验检测细胞侵袭能力；实时定量PCR检测nm23-h1功能相关基因蛋白激酶C-α的表达、激光共聚焦显微镜检测PKC-α蛋白的亚细胞定位。 结果：在Tca8113、Tb、Tca8113M、TSCC、OSC-4、Tca8113/CDDP 6个口腔鳞癌细胞系中，高转移细胞系Tb、Tca8113M 2个细胞系的nm23-h1表达量最低。Tb细胞转染pCMV-nm23-h1质粒，过表达外源性nm23-h1后，细胞增殖速度、克隆形成率、粘附率和侵袭能力均降低（P<0.05），过表达nm23-h1的Tb细胞PKC-α的mRNA表达量以及细胞膜的PKC-α蛋白表达增多（P<0.05）。 结论：高转移口腔鳞癌细胞系nm23-h1表达明显降低；这些细胞高表达外源性nm23-h1后，细胞体外增殖和侵袭能力下降。PKC-α蛋白活性增强可能与nm23-h1抑制细胞增殖和侵袭的作用有关。