树突状细胞DC-SIGN在肾炎肾小管间质损伤中作用研究

摘要

肾脏疾病多系免疫介导或引发的免疫炎症性疾病。此外，无论原发性或继发性肾小球疾病，均可伴有不同程度的肾小管间质损害，且肾小管间质病变是直接影响肾脏疾病进展及患者预后的关键因素。 近年研究发现，树突状细胞(DC) 在肾脏疾病中发挥关键作用，肾炎时肾内DC数量增多，主要聚集于肾小管间质区域，与肾小管间质损伤关系密切。以往研究也发现，DC 参与肾脏浸润和炎症启动，与黏附分子P-选择素起始介导迁移有关，并与肾小管间质早期损伤乃至肾纤维化形成密切相关。利用研制的针对P-选择素lectin-EGF功能域单抗(PsL-EGFmAb)，对DC 迁移浸润具有抑制作用，且该单抗还可通过抑制DC 表面与选择素同属C型凝集素的DC-SIGN 表达，调抑DC刺激T细胞的功能。DC-SIGN(亦称CD209) 是DC特异性免疫调节分子，可介导DC 炎症组织迁移以及与白细胞相互作用等，调节炎症病理生理过程中的天然免疫和适应性免疫。 肾毒性血清性肾炎(NTN) 是一种由免疫介导的人类新月体肾炎的模型。一般认为，该肾炎发病依赖于CD4+Th1细胞和巨噬细胞。近年研究发现，DC在NTN中发挥了重要作用。NTN发生时，肾内DC 可刺激抗原特异性CD4+T细胞，既分泌具有改善NTN 作用的抗炎因子IL-10，同时也分泌Th1 型促炎因子INF-γ，而清除肾内DC 则对肾组织损伤尤其是肾小管间质损伤具有重要影响，表明DC 在NTN 发病中起着关键作用。但目前为止，对NTN 肾内DC 包括浸润方式及其作用机制还不甚清楚。 为此，本实验首先观察了不同病理类型肾炎患者肾组织内DC-SIGN表达及DC-SIGN+DC 分布，探讨与肾炎肾小管间质损伤和病变的关系。 然后在制备大鼠NTN模型基础上，结合PsL-EGFmAb等抗黏附干预手段，观察了肾炎大鼠肾组织DC-SIGN+DC浸润变化。继而，观察分析经干预DC-SIGN+DC浸润后的大鼠肾内DC相关炎症因子、趋化因子以及Th1/Th2平衡等变化。在此基础上，进一步探讨了DC-SIGN+DC 在NTN发病中可能的作用机制。 结果发现，伴随着DC-SIGN 在肾炎患者肾组织以肾小管间质为主广泛高表达，与肾小管间质病变程度明显相关。DC-SIGN+DC以肾小管间质为主分布明显增多，且与患者肾小管间质损伤程度及肾功能改变密切相关。此外，DC-SIGN+DC 在肾小管间质分布数量与DC-SIGN 表达明显相关。利用NTN 大鼠模型进一步发现，DC-SIGN+DC 主要集中于肾小管间质区域，少部分分布在肾小球旁，且随着病变加重明显增多，与肾组织病理损伤和肾功能改变显著相关。继而发现，经PsL-EGFmAb等干预后，伴随着DC-SIGN+DC 浸润减少，肾内IL-10 mRNA 表达上调，TNF-α mRNA和RANTES mRNA 表达下降，Th1/ Th2 值也相应下调，大鼠肾组织损伤和肾功能得以减轻与改善。 由上述实验结果并结合我们以往工作表明，DC的NTN肾内浸润不仅与P-选择素介导有关，也与DC-SIGN的黏附途径相关。在上述过程中，选择素介导了DC 黏附迁移及肾内浸润；而依据DC-SIGN 功能，其更可能在参与DC 迁移中，介导DC 启动免疫应答，以及在DC 调节大鼠肾脏炎症尤其肾小管间质损伤中发挥重要作用。此外，DC-SIGN 及其介导DC的上述作用，也受肾内局部微环境病生理状况的影响，可调控DC诱导的局部免疫应答，以及Th1/ Th2反应的平衡，直至影响肾炎肾小管间质损伤修复或病变进展。 在此基础上进一步表明，PsL-EGFmAb可通过抑制DC-SIGN，而对NTN中DC成熟及功能具有调节作用。提示PsL-EGFmAb不仅可有效阻抑DC 肾内迁移，还可调抑DC 启动的炎症免疫反应，由此可作为一种新的干预手段或途径，用于肾脏等DC 相关免疫炎症性疾病的防治，因而具有潜在的临床应用前景。