失神经支配骨骼肌肌松药敏感性的改变及其机制

摘要

目的：运动神经系统病变、广泛软组织损伤和严重烧伤等多种疾病均可导致相关神经支配的骨骼肌暂时性或者永久性失神经支配，引起患者对肌松药的敏感性异常。骨骼肌的乙酰胆碱受体有成人型(ε-AChR)和胎儿型(γ-AChR)两种亚型。当骨骼肌发生失神经支配时，可出现乙酰胆碱受体总量和亚型的改变，但是失神经支配后不同时间点肌细胞表面受体数量和两个受体亚型的变化趋势并不清楚。本实验拟观察失神经支配后骨骼肌受体总量和亚型的变化及与失神经时间的关系，并探讨这种变化对不同化学结构肌松药效应的影响，从受体水平说明有关疾病对肌松药敏感性异常的原因。 方法：①采用细胞内微电极记录方法观察失神经支配不同时间点几种不同类型和不同化学结构肌松药对骨骼肌动作电位幅度(APA)的抑制作用。②采用RT-PCR和western blot方法观察失神经支配后各个时间点骨骼肌细胞上ε-AChR和γ-AChR mRNA和蛋白表达的变化。③将ε-AChR和γ-AChR分别表达在HEK293细胞上，筛选出能稳定表达两种受体的细胞株，采用全细胞膜片钳来观察不同类型肌松药对两种受体作用的差异。 结果：⑴维库溴铵、阿曲库铵、罗库溴铵和琥珀胆碱剂量依赖性地抑制大鼠骨骼肌APA幅度；失神经支配后骨骼肌细胞对非去极化肌松药(罗库溴铵、维库溴铵和阿曲库铵)的敏感性降低，14d～21d敏感性降至最低。而骨骼肌细胞对去极化肌松药(琥珀胆碱)的敏感性先增加后降低，7～21d敏感性逐渐增高，以后降低。⑵失神经支配后14d AChR总量开始明显增加，并且一直维持在较高水平；γ-AChR表达逐渐增加；ε-AChR表达先减少再增加。⑶筛选出有6株转染ε-AChR的细胞和3株转染γ-AChR的细胞株。维库溴铵对ε-AChR作用的IC50值小于对γ-AChR作用的IC50值。琥珀胆碱对两种受体抑制作用无显著性差异。 结论：①在肌肉失神经支配的7～21d对不同阻滞性质的肌松药敏感性变化是不一样的，对去极化肌松药敏感性增加而对非去极化敏感性降低。②失神经支配后骨骼肌细胞对肌松药敏感性的改变与骨骼肌细胞上乙酰胆碱受体总量和γ-AChR比例增加密切相关。③γ-AChR和ε-AChR对非去极化肌松药反应存在差异。4.临床上存在肌肉瘫痪的患者使用肌松药时不仅要考虑肌松药类型，还要考虑肌肉瘫痪的时间。

目录

文摘

英文文摘

声明

前言

第一部分:维库溴铵、阿曲库铵、罗库溴铵和琥珀胆碱对失神经支配不同时间骨骼肌细胞动作电位抑制的影响

前言

1材料

2方法

3结果

讨论

参考文献

第二部分失神经支配对大鼠骨骼肌细胞乙酰胆碱受体的影响

前言

1材料

2方法

3结果

讨论

参考文献

第三部分维库溴铵和琥珀胆碱对重组成人型和胎儿型乙酰胆碱受体的作用

前言

一.重组成人型和胎儿型乙酰胆碱受体的稳定表达和生理功能鉴定

二维库溴铵和琥珀胆碱对重组成人型和胎儿型乙酰胆碱受体的作用

讨论

参考文献

全文总结

附录1中英文名词对照

附录2综述失神经后骨骼肌萎缩机制及治疗研究进展

附录3发表论文及获奖情况

附录4致谢