Q开关和长脉宽1064nm Nd：YAG激光真皮胶原重建机制的研究

摘要

目的：非剥脱性激光嫩肤技术可诱导真皮胶原重建，在光老化的治疗等方面越来越受到广泛关注。Q开关1064 nm Nd：YAG激光和长脉宽1064 nm Nd：YAG激光是临床上常用的两种非剥脱性激光嫩肤技术。目前非剥脱性激光真皮胶原重建的机制尚不明确，多数学者认为是激光诱导真皮损伤而启动了机体的创伤修复反应。正常创伤修复反应是一个复杂的生物学过程，其中有许多细胞及介质参与。研究表明肥大细胞、神经肽P物质(SP)及其特异性受体神经激肽受体1(NK-1R)参与创伤愈合过程。本研究的目的是定量地评价和比较Q开关1064 nm Nd：YAG激光和长脉宽1064 nm Nd：YAG激光诱导真皮创伤修复过程中Ⅰ型、Ⅲ型胶原、肥大细胞、成纤维细胞、SP和NK-1R mRNA表达的变化，以揭示非剥脱性激光真皮胶原重建的作用机制。
　　 材料和方法：应用Q开关1064nm Nd：YAG激光和长脉宽1064 nm Nd：YAG激光分别对36只雌性昆明小鼠左侧后背头、尾侧皮肤进行连续4次治疗，每次间隔1周，右侧相应的部位作为自身对照。分别于第1次治疗后1小时、1天、7天、21天、30天和60天对小鼠皮肤行活组织取材。应用甲苯胺蓝特殊染色、HE染色、免疫组化、原位杂交方法分别对皮肤组织样品真皮肥大细胞、成纤维细胞、Ⅰ型、Ⅲ型胶原、SP和NK-1R mRNA进行检测。免疫组化、原位杂交方法检测的切片中DAB阳性染色结果应用Motic医学数字图像分析系统进行定量分析。所测的数据以均数±标准差(-x+-s)表示，应用SPSS15.0软件对数据进行单因素方差分析(ANOVA)，不同变量间的相关性检验应用Pearson相关分析，P＜0.05认为有统计学意义。
　　 结果：Q开关1064 nm Nd：YAG激光治疗组：激光治疗后7天、21天、30天和60天，激光治疗组真皮Ⅰ型胶原水平较正常对照组明显增高，差异有统计学意义(分别为P＜0.01)；激光治疗后7天、21天、30天和60天，激光治疗组真皮Ⅲ型胶原水平较正常对照组明显增高，差异有统计学意义(分别为P＜0.01)；激光治疗后1天、7天、21天和30天，激光治疗组真皮肥大细胞总数较正常对照组明显增高，差异有统计学意义(分别为P＜0.01)；激光治疗后1天、7天、21天、30天和60天，激光治疗组真皮脱颗粒的肥大细胞数量较正常对照组明显增高，差异有统计学意义(分别为P＜0.01、P＜0.01、P＜0.05、P＜0.05、P＜0.05)；激光治疗后7天、21天、30天和60天，激光治疗组真皮成纤维细胞数量较正常对照组明显增高，差异有统计学意义(分别为P＜0.01)；激光治疗后1小时和1天，激光治疗组真皮SP表达水平较正常对照组明显降低，差异有统计学意义(分别为P＜0.01)，激光治疗后7天、21天和30天，激光治疗组真皮SP表达水平较正常对照组明显增高，差异有统计学意义(分别为P＜0.01)；激光治疗后1小时、1天、7天、21天、30天和60天，激光治疗组真皮NK-1R mRNA表达水平均较正常对照组明显增高，差异有统计学意义(分别为P＜0.05、P＜0.01、P＜0.01、P＜0.01、P＜0.01、P＜0.01)。长脉宽1064 nm Nd：YAG激光治疗组：激光治疗后21天、30天和60天，激光治疗组真皮Ⅰ型胶原水平较正常对照组明显增高，差异有统计学意义(分别为P＜0.01)；激光治疗后7天、21天、30天和60天，激光治疗组真皮Ⅲ型胶原水平较正常对照组明显增高，差异有统计学意义(分别为P＜0.01、P＜0.05、P＜0.01、P＜0.01)；激光治疗后1小时、1天、7天、21天和30天，激光治疗组真皮肥大细胞总数较正常对照组明显增高，差异有统计学意义(分别为P＜0.01)；激光治疗后1小时、1天、7天、21天、30天和60天，激光治疗组真皮脱颗粒的肥大细胞数量较正常对照组均明显增高，差异有统计学意义(分别为P＜0.01、P＜0.01、P＜0.01、P＜0.05、P＜0.01、P＜0.01)；激光治疗后7天、21天、30天和60天，激光治疗组真皮成纤维细胞数量较正常对照组明显增高，差异有统计学意义(分别为P＜0.05、P＜0.01、P＜0.01、P＜0.01)；激光治疗后1小时和1天，激光治疗组真皮SP表达水平较正常对照组明显降低，差异有统计学意义(分别为P＜0.01)，激光治疗后7天、21天、30天和60天，激光治疗组真皮SP表达水平较正常对照组明显增高，差异有统计学意义(分别为P＜0.01、P＜0.01、P＜0.01、P＜0.05)；激光治疗后1小时、1天、7天、21天、30天和60天，激光治疗组真皮NK-1R mRNA表达水平均较正常对照组明显升高，差异有统计学意义(分别为P＜0.01)。Q开关1064nm Nd：YAG激光治疗组与长脉宽1064 nm Nd：YAG激光治疗组的比较：激光治疗后7天、21天和30天，Q开关1064nmNd：YAG激光治疗组真皮Ⅰ型胶原水平较长脉宽1064nm Nd：YAG激光治疗组明显增高，差异有统计学意义(分别为P＜0.01)，而在激光治疗后60天长脉宽1064 nm Nd：YAG激光治疗组真皮Ⅰ型胶原水平较Q开关1064nm Nd：YAG激光治疗组明显增高，差异有统计学意义(P＜0.05)；激光治疗后7天和21天，Q开关1064nm Nd：YAG激光治疗组较长脉宽1064 nm Nd：YAG激光治疗组真皮Ⅲ型胶原水平明显增高，差异有统计学意义(分别为P＜0.05、P＜0.01)；激光治疗后1小时和7天，长脉宽1064nm Nd：YAG激光治疗组较Q开关1064 nm Nd：YAG激光治疗组真皮肥大细胞总数明显增高，差异有统计学意义(分别为P＜0.01)；激光治疗后1小时和1天，长脉宽1064 nm Nd：YAG激光治疗组真皮脱颗粒的肥大细胞数量较Q开关1064 nmNd：YAG激光治疗组明显增高，差异有统计学意义(分别为P＜0.01)；激光治疗后7天和21天，Q开关1064 nm Nd：YAG激光治疗组较长脉宽1064 nm Nd：YAG激光治疗组真皮成纤维细胞数量明显增高，差异有统计学意义(分别为P＜0.05)，而激光治疗后60天，Q开关1064 nm Nd：YAG激光治疗组较长脉宽1064 nm Nd：YAG激光治疗组真皮成纤维细胞数量明显降低，差异有统计学意义(p<0.05)；激光治疗后1小时，长脉宽1064 nm Nd：YAG激光治疗组较Q开关1064 nm Nd：YAG激光治疗组真皮SP表达水平明显降低，差异有统计学意义(P＜0.05)；激光治疗后1小时，长脉宽1064 nm Nd：YAG激光治疗组较Q开关1064 nm Nd：YAG激光治疗组真皮NK-1R mRNA表达水平明显增高，差异有统计学意义(P＜0.05)，而激光治疗后7天和21天，Q开关1064 nm Nd：YAG激光治疗组较长脉宽1064 nm Nd：YAG激光治疗组真皮NK-1R mRNA表达水平明显增高，差异有统计学意义(分别为P＜0.05)。不同检测指标间相关性分析结果：真皮脱颗粒的肥大细胞数量与真皮成纤维细胞数量呈显著正相关，差异有统计学意义(r=0.732，P＜0.01)；真皮脱颗粒的肥大细胞数量与真皮Ⅰ型、Ⅲ型胶原水平分别呈显著正相关，差异有统计学意义(分别为r=0.654，P＜0.01；r=0.671，P＜0.01)；真皮SP表达水平与真皮成纤维细胞数量呈显著正相关，差异有统计学意义(r=0.629，P＜0.01)；真皮SP表达水平与真皮脱颗粒的肥大细胞数量呈显著正相关，差异有统计学意义(r=0.537，P＜0.01)；真皮SP表达水平与真皮Ⅰ型及Ⅲ型胶原水平分别呈显著正相关，差异有统计学意义(分别为r=0.578，P＜0.01；r=0.707，P＜0.01)，真皮SP表达水平与真皮Ⅲ型胶原/Ⅰ型胶原的比例呈显著正相关，差异有统计学意义(r=0.696，P＜0.01)；真皮NK-1R mRNA表达水平与真皮成纤维细胞数量呈显著正相关，差异有统计学意义(r=0.674，P＜0.01)；真皮NK-1R mRNA表达水平与真皮Ⅰ型、Ⅲ型胶原水平分别呈显著正相关，差异有统计学意义(分别为r=0.579，P＜0.01；r=0.672，P＜0.01)；真皮NK-1R mRNA表达水平与真皮Ⅲ型胶原/Ⅰ型胶原的比例呈显著正相关，差异有统计学意义(r=0.641，P＜0.01)。
　　 结论：非剥脱性激光嫩肤技术可诱导真皮肥大细胞、SP和NK-1R mRNA表达的变化，伴随着真皮成纤维细胞增生和胶原重建，尽管Q开关1064 nm Nd：YAG激光和长脉宽1064 nm Nd：YAG激光的作用效果不同。我们的研究提示肥大细胞、SP和NK-1R可能参与非剥脱性激光诱导的炎症反应、成纤维细胞增生和真皮胶原重建。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：专业术语中英文对照表

第一章 Q开关和长脉宽1064nm Nd：YAG激光真皮胶原重建疗效的比较性研究

前言

实验材料和方法

实验结果

讨论

结论

参考文献

第二章 Q开关和长脉宽1064nm Nd：YAG激光真皮胶原重建中肥大细胞变化的比较性研究

前言

实验材料和方法

实验结果

讨论

结论

参考文献

第三章 Q开关和长脉宽1064nm Nd：YAG激光真皮胶原重建中P物质表达的比较性研究

前言

实验材料和方法

实验结果

讨论

结论

参考文献

第四章 Q开关和长脉宽1064nm Nd：YAG激光真皮胶原重建中NK-1R mRNA表达的比较性研究

前言

实验材料和方法

实验结果

讨论

结论

参考文献

博士后研究期间科研成绩

致谢