Delta阿片受体激动剂DADLE对SH-SY5Y细胞及大鼠原代皮层神经元转录的影响及其机制研究

摘要

目的：观察delta阿片受体激动剂DADLE([D-Ala2,D-Leu5] enkephalin)对SH-SY5Y和原代神经元转录的影响及其作用机制。
　　 方法：培养神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y和大鼠原代皮层神经元，原代神经元采用微管相关蛋白2(MAP2)免疫荧光鉴定其纯度。采用不同浓度的DADLE（100pM, 1nM, 10nM, 100nM, 1uM, 10uM）与SH-SY5Y及神经元共培养不同的时间（24h, 36h, 48h, 60h, 72h），应用[3H]-脲嘧啶掺入法测定SH-SY5Y细胞及神经元的转录水平，LDH法检测DADLE对细胞损伤的情况，MTT法检测神经元的活力。Western blotting技术检测神经元RNA聚合酶II合成的量及其活性的变化情况。
　　 结果：DADLE在不同浓度均能抑制SH-SY5Y和神经元的转录，其抑制率与DADLE的浓度无线性关系；DADLE对两种细胞的转录抑制率与作用时间也不呈线性关系；对神经元，将DADLE洗脱后72小时，其转录抑制效果完全消失。10uM的DADLE作用72小时并未造成SH-SY5Y细胞的损伤。MTT检测显示DADLE不影响神经元的活力。Western blotting技术显示DADLE降低了神经元RNA聚合酶II的活性。
　　 结论：DADLE能够抑制SH-SY5Y的转录，能可逆性抑制神经元的转录，并且对这两种细胞不造成损伤。DADLE抑制神经元转录的机制可能是通过降低RNA聚合酶II的活性实现的。

目录

前言

第一部分 DADLE对SH-SY5Y细胞转录的影响

第二部分 DADLE对大鼠原代皮层神经元的转录的影响及其机制研究

致谢

综述

论著

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