口腔鳞癌分子诊断及分子分型生物标志物的初步研究

摘要

目的:口腔鳞癌的个体化诊断和治疗需要分子诊断及分子分型方法的支持。本研究的主要目的是建立口腔鳞癌分子诊断及分子分型技术和方法,并对潜在的生物标志物进行筛选、分析和验证,以确定口腔鳞癌分子诊断、分化程度、侵袭、转移和个体化化疗等相关的分子靶点。
　　方法:1.在前期基因表达谱研究初步筛选的78个口腔鳞癌相关基因基础上,采用Real-time PCR的方法在mRNA水平检测了120例临床肿瘤组织标本和120例正常组织标本中78个候选基因和1个管家基因的表达,并采用统计学方法分析和确定口腔鳞癌差异基因及与其发生、侵袭及转移等相关基因表达谱型。
　　2.应用免疫组化方法在口腔鳞癌组织芯片中检测cyclin D1蛋白表达,采用统计学方法分析cyclin D1蛋白表达与各项临床病理学参数和预后的关系。
　　3.应用免疫组化技术检测100例接受诱导化疗(诱导组)和124未接受诱导化疗(非诱导组)的晚期口腔鳞癌患者活检组织标本中cyclin D1蛋白表达情况,分析该蛋白表达与各项临床病理学参数、化疗疗效及各亚组中的生存情况的关系,从而验证该蛋白作为指导临床个体化化疗生物标志物的可行性。
　　结果:1.“SPP1+KRT15+MAI”3个基因是口腔鳞癌差异基因的表达谱型(AUC:0.986,95％CI:0.961-0.997;敏感度96.4％,特异度94.7％)。
　　2.“CDK2+ITPR1+PLAU”3个基因是预测病理分级高低(Ⅰ,Ⅱ级与Ⅲ级)的最佳基因表达谱型(AuC:0.811,95％CI:0.726 to0.879;敏感度为86.7％,特异度为63.5％);而“MMP7+MMP1+p21+IL1RN+CDKN2A”5个基因是预测浸润性生长的最佳基因表达谱型(AUC:0.749,95％CI:0.661 to0.823;敏感度为60.3％,特异度为87.7％)。
　　3.“PDGFRA+PLAU+SOX9+SPP1+CDKN2A+CASP1+MAL”7个基因是预测颈淋巴结转移的最佳基因组合(AUC:0.769,95％CI:0.675 to0.846;敏感度为71％,特异度为75％);而