声明
摘要
第一章 前言
1.1 分泌蛋白及其在癌症发生发展和化疗耐受中的作用
1.1.1 分泌蛋白在癌症早期阶段中的作用
1.1.2 分泌蛋白在癌症转移中的作用
1.1.3 分泌蛋白在癌细胞耐受抗癌药物中的作用
1.1.4 分泌蛋白的多重作用特性
1.2 分泌组学及其研究方法/策略
1.2.1 基于二维凝胶电泳的分析方法
1.2.2 基于液相色谱—串联质谱联用的分析方法
1.3 癌症分泌组学的主要研究内容、意义及其应用
1.3.1 癌症早期诊断
1.3.2 癌症转移
1.3.3 癌症化疗耐受
1.4 癌症分泌组学研究的发展趋势
1.4.1 研究样品应逐渐实现从体外向体内的过渡
1.4.2 建立有效提高分泌蛋白检出效率的研究方法
1.4.3 系统的后期验证工作
1.4.4 关键分泌蛋白的生物学功能解析
1.5 本论文的研究内容
参考文献
第二章 基于细胞培养的分泌组学研究方法的优化及其在乳腺癌耐药研究中的应用
2.1 引言
2.1.1 基于细胞培养的分泌组学研究方法
2.1.2 分泌蛋白在肿瘤细胞耐受抗癌药物中发挥重要作用
2.1.3 细胞系研究模型
2.1.4 本章研究工作
2.2 实验材料和方法
2.2.1 细胞系
2.2.2 临床乳腺癌组织样品
2.2.3 主要的试剂与试剂盒
2.2.4 主要的耗材
2.2.5 主要的仪器设备
2.2.6 引物序列
2.2.7 主要溶液的配制
2.2.8 实验方法
2.3 实验结果和讨论
2.3.1 优化基于细胞培养的分泌组学研究的实验方法
2.3.2 鉴定MCF-7细胞和MCF-7/Dox细胞的分泌蛋白质组
2.3.3 筛选与乳腺癌细胞耐受多柔比星相关的分泌蛋白
2.3.4 多角度分析与乳腺癌细胞耐受多柔比星相关的分泌蛋白
2.3.5 验证IL-18与肿瘤细胞耐药的相关性
2.4 小结
参考文献
第三章 应用凝集素捕获技术提高分泌蛋白鉴定效率
3.1 引言
3.2 实验材料和方法
3.2.1 细胞系
3.2.2 主要的试剂与试剂盒
3.2.3 主要的耗材
3.2.4 主要的仪器设备
3.2.5 主要溶液的配制
3.2.6 实验方法
3.3 实验结果和讨论
3.3.1 蛋白质鉴定结果总览
3.3.2 凝集素亲和捕获技术具有良好的重现性
3.3.3 凝集素亲和捕获技术的优势
3.4 小结
参考文献
第四章 基于新鲜组织培养的结直肠癌早期诊断生物标志物的筛选
4.1 引言
4.1.1 结直肠癌的早期诊断需要新型血清生物标志物
4.1.2 研究样品应逐渐实现从体外向体内的过渡
4.1.3 基于新鲜组织培养的癌症分泌组学研究的瓶颈问题
4.1.4 本章研究内容
4.2 实验材料与方法
4.2.1 细胞系
4.2.2 临床血清/组织样品
4.2.3 主要的试剂与试剂盒
4.2.4 主要的耗材
4.2.5 主要的仪器设备
4.2.6 主要溶液的配制
4.2.7 实验方法
4.3 实验结果和讨论
4.3.1 评估新鲜组织培养体系中的细胞生长状态
4.3.2 质谱鉴定结果概览
4.3.3 凝集素亲和捕获技术用于基于组织培养的分泌组学研究的优势
4.3.4 差异表达的分泌蛋白的筛选及多角度分析
4.3.5 初步挑选候选蛋白质并验证抗体特异性
4.3.6 验证EFEMP2作为结直肠癌早期诊断的生物标志物的可行性
4.4 小结
参考文献
第五章 总结与展望
5.1 主要结论
5.2 创新点
5.3 研究展望
附录一 符号与标记
致谢
攻读博士学位期间发表的论文及参与的科研项目