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生长因子修饰的无细胞基质替代膀胱的实验研究

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绪论

第一部分 VEGF纳米粒子的制备以及与膀胱无细胞基质的复合

1.1引言

1.2材料与方法

1.3实验结果

1.4实验结论

第二部分:VEGF纳米粒子修饰后的无细胞基质在小动物体内膀胱替代的研究

2.1引言

2.2实验材料和方法

2.3实验数据处理

2.4实验结果

2.5实验讨论

第三部分:经修饰的无细胞基质在大型动物体内膀胱替代的研究

3.1前言

3.2实验方法和材料

3.3实验数据处理

3.4实验结果

3.5 实验讨论

结论

展望

参考文献

致谢

附录:硕士在读期间发表或投稿的论文

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摘要

背景与目的:
  膀胱无细胞基质(BAMA)替代膀胱后,再生过程中的挛缩现象是组织工程研究的基础性难题,血管再生不足可能是导致挛缩的重要原因。本项研究将可长期(2~3月)缓释VEGF的PLGA纳米微粒与BAMA复合,期待长期缓释的VEGF在动物体内刺激血管再生,为获得组织工程研究中膀胱的替代材料奠定动物实验基础。
  材料和方法:
  将复合了载VEGF纳米粒子的无细胞基质(5cm*5cm)替代猪膀胱,分别于术后1W,2W,4W,12W测量再生部分膀胱面积大小,血管再生情况以及肌层形态学特征,体外游离肌条特性并通过ELISA测量再生部分膀胱的VEGF含量。实验组采用复合VEGF纳米粒子的膀胱无细胞基质替代膀胱,对照组采用单纯的膀胱无细胞基质为膀胱替代材料。每个时间节点实验组动物(小型猪)3只,对照组3只。
  结果:
  实验组再生膀胱组织中的VEGF表达可持续3个月,表明VEGF在体内能长期缓释。组织学观察显示实验组的血管和肌肉组织的再生较对照组良好,同时实验组的胶原基质降解较对照组明显。1月、3月组中,实验组的再生膀胱面积均大于对照组,3月组中,实验组的挛缩率较对照组下降了约57%。体外游离肌条分析提示,实验组和对照组的再生膀胱与该猪的自体膀胱在功能方面无明显区别。
  结论:
  载VEGF纳米粒子修饰的无细胞基质在体内可长期缓释VEGF,刺激血管再生,并有效抑制了挛缩,长期缓释的VEGF并未改变再生膀胱组织的生理学特性。本研究首次完成了对BAMA诱导膀胱再生时挛缩现象的有效抑制,同时本研究也通过实验证实了血管再生不足是导致挛缩发生的重要因素。

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