miRNA在吉西他滨耐药的胰腺癌患者血浆中及胰腺癌患者血浆中表达的初步研究

摘要

胰腺癌的起病隐匿、死亡率高、预后差，其中位生存期仅为6个月。造成胰腺癌预后差的主要原因包括胰腺癌的早期诊断率低、化疗耐药率高等。胰腺癌缺少大规模筛查方法，早期诊断率低，大部分患者在出现症状就诊时，已失去最佳手术机会。对于无法手术的患者，化疗是其首选治疗方案。其中，又以吉西他滨为其一线化疗药物在临床上广泛使用。但是，胰腺癌患者易对吉西他滨产生耐药性，导致药物的敏感性下降，因而严重影响了化疗的疗效。寻找简单方便的胰腺癌筛查方法，提高早期胰腺癌的诊断率，并且降低或逆转胰腺癌对吉西他滨化疗的耐药性，是目前亟待解决的问题。
　　microRNA(miRNA)是一类非编码的单链RNA，其长度在19-24个核苷酸之间，其不仅存在于组织细胞中，也广泛存在于外周循环血中。miRNA可以通过与靶mRNA的尾端非编码区相结合，抑制mRNA的翻译或者对靶mRNA进行降解，以此调节功能性蛋白的表达水平，进而参与人体的多种生理以及病理过程。既往研究表明，miRNA在多种肿瘤组织及血浆中中呈现出表达量的异常改变，提示其与肿瘤的发生、发展以及对化疗药物的耐药性存在一定的相关性。通过研究miRNA在胰腺癌患者、以及对吉西他滨耐药的胰腺癌患者体内特异性的表达谱，可以为提高胰腺癌的早期诊断率、增加胰腺癌对吉西他滨的敏感性、进而提高胰腺癌的生存期提供新的思路。
　　第一部分胰腺癌吉西他滨耐药患者特异性循环miRNA的筛选
　　目的：检测对吉西他滨耐药的胰腺癌患者血浆中表达呈现明显异常的microRNA，为寻找新的生物标志物用于胰腺癌的用药指导和吉西他滨的疗效预测提供新的思路。
　　方法：收集对吉西他滨耐药的胰腺癌患者血浆，抽提血浆RNA，采用qPCR方法检测并筛选出对吉西他滨耐药的胰腺癌患者血浆中相比于对吉西他滨不耐药的胰腺癌患者表达差异明显的microRNA。
　　结果：对吉西他滨耐药的胰腺癌患者相较于不耐药患者存在表达差异的microRNA有24个，其中6个下调（miR-3145-5p，miR-214、miR-4328、miR-7、miR-3907及miR-639），18个上调（miR-323-3p，miR-450a、miR-301b、miR-655、miR-340#、miR-369-5p、miR-656、miR-224、miR-544、miR-32、miR-433、miR-361-3p、miR-199b-5p、miR-548a-3p、miR-551b、miR-154及miR-3182）。
　　结论：胰腺癌患者中对吉西他滨耐药和不耐药者血浆microRNA存在较显著差异，其有可能作为一种潜在的分子标志物预测吉西他滨在胰腺癌化疗过程中的疗效。
　　第二部分胰腺癌患者特异性循环miRNA的筛选
　　目的：检测胰腺癌患者血浆中表达差异的microRNA，为寻求新的分子标志物用于胰腺癌的无创性诊断提供理论依据。
　　方法：收集胰腺癌患者血浆，抽提血浆RNA，采用qPCR方法检测并筛选出胰腺癌患者血浆中相比于正常人表达呈现明显差异的microRNA。
　　结果：胰腺癌患者相较于健康人存在表达差异的microRNA共28个，其中25个下调（miR-7，miR-155，miR-204，miR-1260b，miR-1228，miR-10b，miR-1281，m m m结果：胰腺癌患者相较于健康人存在表达差异的microRNA共28个，其中25个下调（miR-7，miR-155，miR-204，miR-1260b，miR-1228，miR-10b，miR-1281，iR-3187，miR-3907，miR-3619，miR-4274，miR-4328，miR-3145-5p，miR-497，iR-214，miR-4728-3p，miR-718，miR-4785，miR-4669，miR-636，miR-4687-5p，iR-638，miR-639，miR-941，miR-874），3个上调（miR-32，miR-3182和miR-625#）。
　　结论：胰腺癌患者血浆中microRNA表达与正常人群有较显著的差异，其有可能成为帮助胰腺癌早期诊断及筛查的分子标志物。

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英文缩略词

第一部分 胰腺癌吉西他滨耐药患者特异性循环miRNA的筛选

绪论

材料与方法

结果

讨论

参考文献

第二部分 胰腺癌患者特异性循环miRNA的筛选

绪论

材料与方法

结果

讨论

参考文献

附录

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