光透明技术在活体流式细胞仪中的应用

摘要

恶性肿瘤是威胁人类健康的最大敌人之一。在我国有90％的肿瘤患者逝于五年内的复发和转移,可以说肿瘤的复发和转移是导致癌症患者低存活率的重要原因。在这个过程中,循环肿瘤细胞是影响肿瘤转移最为关键的因素之一,已成为诊断肿瘤恶性程度和预后判定的重要依据。
　　活体流式细胞仪作为一种新型的活体检测技术,可以实时动态无损的定量监测血液中循环肿瘤细胞的变化情况,为实验室对恶性肿瘤及扩散等重大疾病的早期诊断研究提供支持。但是,由于光在组织中受到强烈的散射而不能传播的很深,活体流式细胞仪的检测深度受到了限制。
　　在本研究中,我们将光透明的概念引入到活体流式细胞仪的检测中,把一种新型的鼠耳光透明剂(ESOCA)作用在实验动物耳部,相比传统实验中使用的甘油有效的减小了鼠耳皮肤组织对光的散射,增加了活体流式细胞仪的检测深度,提高了来自深层组织的荧光信号质量,而且具有更好的生物安全性。同时我们利用活体流式细胞仪成功实现了对不同荧光强度和不同尺寸大小的荧光颗粒的区分。
　　我们的研究为活体流式细胞仪用于小动物模型深层组织的荧光信号检测奠定了基础,并为以后将活体流式细胞仪用于大型哺乳动物甚至人身上提供了帮助。

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第一章 绪论

1.1肿瘤的研究现状

1.2活体流式细胞仪

1.3活体流式细胞仪的先进性

1.4皮肤的光学特性

1.5光透明技术

1.6研究内容和章节安排

第二章 活体流式细胞仪系统的搭建和实验方法

2.1活体流式细胞仪光路

2.2活体流式细胞仪实验方法

2.3皮肤光学特性参数的测定

2.4本章小结

第三章 数据处理

3.1活体流式细胞仪信号处理

3.3本章小结

第四章 光透明剂对活体流式细胞仪信号检测的改善

4.1 CCD成像的改善

4.2光透过率的变化

4.3活体流式细胞仪信号峰的变化

4.4检测深度的变化

4.5血液流速的影响

4.6本章小结

第五章 荧光微球的活体检测

5.1荧光微球

5.2荧光微球在体内的消逝

5.4本章小结

第六章 总结与展望

6.1本文的主要内容和结论

6.2展望

参考文献

致谢

攻读硕士学位期间已发表或录用的论文