miR-429与肿瘤干细胞CD133在大肠癌中的表达及相关性研究

摘要

就全世界范围来看，大肠癌已经成为最常见的癌症之一，已经对人们的身体健康产生了非常严重的危害。由于大肠癌的发病率非常高以及诊断技术十分落后，直接加速了准确高效的诊断治疗技术的发展。其中miR-429在内的microRNA-200家族本质上属于一种类上皮细胞的标记物，并且可以在很多的恶性肿瘤中发生异常的表达，对肿瘤的发生发展有着非常重要的作用。CD133属于一种肿瘤干细胞的新类型的标志物，主要是表达部位是在肝癌以及宫颈癌中，尽管它的作用以及功能还没有得到验证，但是按照目前的研究可以得知，CD133的表达和激活细胞的干性的一些信号通路以及抗细胞凋亡的作用有着非常紧密的联系。经过相关的研究表明，结肠癌中也存在很多的CD133阳性的肿瘤干细胞。本文的课题就是关于miR-429在大肠癌中的作用以及和CD133的关系进行研究分析，目的是明确的说明大肠癌的发生发展过程中两者之间存在的联系，可以为以后的大肠癌的诊断治疗提供坚实的理论依据。本文的实验主要是利用了荧光活化细胞分选方法，找出了CD133的不相同的细胞亚群，然后通过使用荧光定量PCR分别对两个组的细胞的miR-429的表达进行检测，并在非肥胖糖尿病或者患有严重联合免疫缺陷(NOD/SCID)小鼠体内设计出移植肿瘤的模型，在不同的时刻对肿瘤的体积以及质量进行测量记录，最后对CD133+和CD133-两组肿瘤的CD133 mRNA和蛋白质表达进行详细的检测。经过研究分析发现，血清中检测出来的CD133+细胞为67.9％，C而且D133+比例与miR-429表达表现为反比例关系（P<0.05）；miR-429+/CD133+组的移植瘤体积及质量和对照组进行对比之后具有明显的统计学差异（P<0.05）。本课题的研究主要是为大肠癌的治疗方法提供新的理论依据。

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英文缩略词表

一、绪论

1.大肠癌研究背景

2.关于 microRNA的背景和研究现状

3．关于肿瘤干细胞和CD133背景以及研究现状

4. microRNA与肿瘤干细胞关系的研究进展

二、 材料与方法

1.细胞培养

2.动物

3.主要实验试剂无水乙醇

4. 常用试剂配制

5.仪器设备

6.方法

7.统计学方法

三、结果

3.1 大肠癌HT-29细胞分选

3.2各亚群miR-429及其表达

3.3miR-429在稳定株中的表达情况

3.4小鼠移植瘤生长情况

3.4 小鼠体内移植瘤中CD133表达情况

四、讨论

五、结论

参考文献

microRNA与肿瘤干细胞研究进展（综述）

附录

硕士期间科研成果

致谢