腺病毒载体介导肝细胞生长因子对脊髓损伤的基因治疗及相关机理探讨

摘要

第一部分腺病毒载体介导肝细胞生长因子对脊髓胶质瘢痕的实验研究及相关机理探讨;该研究将腺病毒介导的肝细胞生长因子转染体外培养的星形胶质细胞,并对该细胞进行划伤以模拟体内损伤,观察HGF对星形胶质细胞增殖的影响.结论:肝细胞生长因子对正常生长的星形胶质细胞无作用,而对划伤的星形胶质细胞的增殖具有双重作用,在低剂量是促进、高剂量时抑制增殖,SPP信号途径在其中发挥作用.第二部分肝细胞生长因子对脊髓神经再生的实验研究;该研究通过观察HGF蛋白对体外培养脊髓神经组织离断突起的作用,证实HGF能促进神经再生,并在体内通过Ad-HGF转染进一步证实其能促进皮质脊髓束的再生,为其在脊髓损伤中的应用,奠定一定的理论基础.结论:建立了一种原位观察神经突起再生的方法,在此基础上证实肝细胞生长因子体外能促进脊髓组织神经突起再生,体内能促进皮质脊髓束再生.

目录

主要英文缩略词表

abstract

引言

第一部分腺病毒载体介导肝细胞生长因子对脊髓胶质瘢痕的实验研究及相关机理探讨

实验一：重组腺病毒Ad-HGF的构建和鉴定

1.实验材料

2.方法

3.结果

4.讨论

实验二：Wistar新生鼠星形胶质细胞原代培养，分离和纯化

1.实验材料

2.方法

3.结果

4.讨论

实验三：Ad-HGF对划伤后原代星形胶质细胞的作用

1.实验材料

2.方法

3.结果

4.讨论

实验四：HGF蛋白对正常和划伤星形胶质细胞的作用及相关机理探讨

1.实验材料

2.实验方法

3.结果

4.讨论

第二部分肝细胞生长因子对脊髓神经再生的实验研究

一：体外实验：神经再生模型的建立和HGF蛋白对离断神经突起的作用

1.实验材料

2.方法

3.结果

4.讨论

二：体内实验：Ad-HGF对离断皮质脊髓束再生的影响

1.实验材料

2.方法

3.结果

4.讨论

附图

结论

参考文献

综述：胶质瘢痕与脊髓损伤修复

致谢