骨钙素与冠心病人群NAFLD的关系及其通过Nrf2及JNK通路改善小鼠NAFLD的机制研究

摘要

目的：近年来研究认为由成骨细胞分泌的小分子蛋白—骨钙素可参与调节机体糖脂及能量代谢，可能与冠心病（Coronary artery disease，CAD）及非酒精性脂肪性肝病（Nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD）患病相关，且骨钙素调节NAFLD的分子机制尚不明确。本研究旨在分析CAD人群中血清骨钙素水平与NAFLD的关系，并探讨外源性骨钙素干预对高脂饮食诱导的小鼠NAFLD的影响及其调节机制。
　　材料和方法：研究对象为174名2008年7月至2010年1月至上海交通大学附属第六人民医院心内科住院进行冠脉造影检查并依此被诊断为 CAD的患者。所有研究对象均经腹部超声诊断有无脂肪肝，根据非酒精性脂肪性肝病诊疗指南（2010修订版）中的临床定义诊断有无NAFLD。血清骨钙素水平经电化学发光免疫法测定。此外，将体重相近的6周龄C57/BL6J雄性小鼠随机分为三组：普通饮食对照组（普通饮食+生理盐水腹腔注射），高脂饮食对照组（高脂饮食+生理盐水腹腔注射），高脂饮食+骨钙素干预组（高脂饮食+非羧化骨钙素30ng/g/day腹腔注射）。干预12周后，检测三组小鼠NAFLD形成情况及肝脏氧化应激状态，并检测核因子E2相关因子2（Nuclear factor erythroid2-related factor2，Nrf2）及c-Jun氨基末端激酶（c-Jun N-terminal kinase，JNK）通路在骨钙素调节NAFLD形成中的作用。
　　结果：NAFLD组 CAD患者血清骨钙素水平较非 NAFLD组 CAD患者显著下降[16.2（14.2－23.8）ng/mL vs20.7（15.6－26.2）ng/mL，P＜0.05]。偏相关分析显示在校正了性别及年龄后，血清骨钙素水平与NAFLD患病（r=－0.260，P=0.010）、空腹血糖（r=－0.230，P=0.023）及糖化血红蛋白（r=－0.229，P=0.023）呈负相关。Logistic回归分析显示体重指数（β=0.345，P＜0.001）、糖化血红蛋白（β=0.641，P=0.004）及甘油三酯（β=1.002，P＜0.001）为 NAFLD患病的独立正性影响因素，而血清骨钙素水平（β=－0.097，P=0.025）为NAFLD患病的独立负性影响因素。外源性骨钙素干预可显著降低高脂饮食诱导增加的小鼠肝脏甘油三酯含量及血清肝酶水平（P＜0.01~0.001）。与高脂饮食对照组相比，高脂饮食+骨钙素干预组小鼠肝脏丙二醛水平、8-异前列腺素 F2α水平及氧化型/还原型谷胱甘肽比值明显降低（P＜0.01~0.001）。骨钙素干预可增加高脂饮食喂养小鼠肝脏 Nrf2核内蛋白表达（P＜0.05），上调过氧化氢酶、超氧化物歧化酶1及谷胱甘肽过氧化物酶1在肝脏的基因表达水平（P＜0.05）。骨钙素干预还可降低高脂喂养小鼠肝脏磷酸化JNK蛋白水平（P＜0.05）。小鼠肝脏中可检测到骨钙素的推定受体—G蛋白偶联受体C家族6组成员A（G protein coupled receptor family C，group6，subtype A；GPRC6A）表达。
　　结论：冠心病人群中血清骨钙素水平是非酒精性脂肪性肝病患病的负性影响因素。骨钙素可能通过与肝细胞GRPC6A结合后激活Nrf2并抑制JNK活化改善高脂饮食诱导的小鼠NAFLD。

目录

声明

缩略词

绪论

第一部分血清骨钙素水平与冠心病人群中非酒精性脂肪性肝病的关系

前言

研究方法

结果

讨论

参考文献

第二部分骨钙素通过Nrf2及JNK通路改善高脂饮食诱导小鼠非酒精性脂肪性肝病的机制研究

前言

研究方法

结果

讨论

参考文献

全文结论

致谢

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