盐度变化对斜带石斑鱼生理生化的影响变化规律研究

摘要

斜带石斑鱼(Epinphelus coioides)，属鲈形目(Perciformes)、鮨科(Serranidae)、石斑鱼属，主要分布于热带亚热带海区，具有营养丰富，肉嫩味美等优点，是我国南方沿海网箱养殖的主要经济鱼类之一，其供给主要依靠沿海养殖和近海捕捞，数量远不能满足消费需求，因此斜带石斑鱼的人工养殖具有广阔的前景。目前，斜带石斑鱼只能在沿海地区进行养殖，且在操作过程中易受盐度的影响出现死亡现象。本文通过研究急性盐度胁迫和慢性盐度胁迫对斜带石斑鱼幼鱼鳃丝Na+/K+-ATP酶活性、氯细胞结构和数量及应激指标的影响，试图从生理生化方面了解斜带石斑鱼在不同盐度刺激下的渗透调节和应激反应机制，以期为斜带石斑鱼的淡化转运、低盐度地区的推广养殖和养殖过程的水质调控提供理论依据。主要研究内容包括：
　　 (1)将养殖于自然海水(34‰)中的斜带石斑鱼幼鱼(体重19.59±0.25g，n=60)直接转移至24‰、14‰、4‰和0水体中进行急性盐度胁迫试验。于转移后1、3、6、12和24h分别检测鳃丝Na+/K+-ATP酶活性、制作鳃丝石蜡切片、检测血清中血糖、天门冬氨酸氨基转移酶、溶菌酶及肝脏中超氧化物歧化酶含量的变化。试验表明：试验组Na+/K+-ATP酶活性变化基本一致，均在1h时达到最高值，随后下降，至6h达到稳定且均显著高于对照组(P＜0.05)；鳃丝氯细胞数量除0组外差异不显著；血糖在24‰和14‰组呈下降趋势，4‰和0组在胁迫3h时出现最低值，在6h时达到峰值，随后逐渐下降；天门冬氨酸氨基转移酶水平在24‰和14‰组与对照组无显著差异(P＞0.05)，4‰和0组均呈现先上升后下降的趋势，于6h和12h时达到各自峰值；超氧化物歧化酶含量在试验期间差异显著(P＜0.05)，24‰和14‰组在3h达到最小值，6h到达峰值，随后呈下降趋势，4‰组在6h达到最小值，12h达到峰值，随后呈下降趋势，0组呈现先上升后下降的趋势，在3h达到峰值；溶菌酶含量在试验24h时，24‰、14‰和4‰组间差异显著(P＜0.05)，0组呈现先上升后下降的趋势，至6h时达到峰值。
　　 (2)将养殖于自然海水(34‰)中的斜带石斑鱼幼鱼(体重19.59±0.25g，n=60)，按照盐度10‰之前每天降低3‰，至10‰后每天降低1‰的速度，逐渐驯养于24‰、14‰和4‰水体中。于转移后1、3、6和9天分别检测鳃丝Na+/K+-ATP酶活性、制作鳃丝石蜡切片、检测血清中血糖、天门冬氨酸氨基转移酶、溶菌酶及肝脏中超氧化物歧化酶含量的变化。试验表明：试验组Na+/K+-ATP酶活性变化基本一致，均在第3天达到最高值，随后下降，至第6天达到稳定；鳃丝氯细胞在24‰组变化不显著，14‰组氯细胞数量略有减少，4‰组氯细胞在6天后出现显著差异，氯细胞数量减少，胞核较大，H.E染色较深，细胞处于较原始的状态；各盐度试验组血糖变化趋势相一致，均在第6天到达峰值随后呈下降趋势；AST水平在24‰组和4‰组随时间的延长呈上升趋势，在第9天后到达各自的最高值，14‰组则呈现持续下降趋势，在第9天时达到其最小值；SOD活性随时间的延长呈现先降低后上升的趋势，在第3天时到达各自的最小值，各试验组间SOD活性差异显著(P＜0.05)；溶菌酶活性随时间的延长呈上升趋势，并在第6天达到各自的峰值，随后逐渐下降并趋于稳定，各盐度处理组间差异显著(P＜0.05)。
　　 综上所述，本文通过研究斜带石斑鱼在急性和慢性盐度胁迫下鳃部结构和功能及应激反应指标的变化显示，在急性盐度胁迫时，由34‰转移至24‰和14‰后，斜带石斑鱼幼鱼应激强度较弱；由34‰转移至4‰和0后，斜带石斑鱼幼鱼应激反应较大，适应盐度变化需时较长。根据本试验结果，在对其进行应激性淡化转运时，可将其直接从34‰高盐度自然海水中转移至14‰的水体后，再缓慢降至预定盐度，从而减少淡化时间；在慢性盐度胁迫时，由34‰逐渐转移至24‰、14‰和4‰水体中，斜带石斑鱼幼鱼均能较快适应盐度变化并最终达到稳定状态。这表明，通过盐度驯养，斜带石斑鱼能够较好的适应4‰以上的低盐度水环境，为低盐度地区石斑鱼的养殖提供数据依据。

目录

文摘

英文文摘

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引言

1. 鱼类的渗透调节机制

2. 鱼类能量代谢反应

3. 鱼类的非特异性免疫

4. 斜带石斑鱼的生物学特性

5. 本研究的目的及意义

第一章 急性盐度胁迫对斜带石斑鱼鳃NA+/K+-ATP酶活性及氯细胞结构的影响

1. 材料与方法

1.1. 试验设计与样品采集

1.2. 样本测试

1.3. 数据分析

2. 结果

2.1. 急性盐度胁迫对斜带石斑鱼鳃丝Na+/K+-ATP酶活性的影响

2.2. 急性盐度胁迫对斜带石斑鱼鳃结构的影响

3. 讨论

3.1. 急性盐度胁迫对斜带石斑鱼Na+/K+-ATP酶活性的影响

3.2. 急性盐度胁迫对斜带石斑鱼鳃结构的影响

第二章 急性盐度胁迫对斜带石斑鱼应激指标的影响

1. 材料与方法

1.1. 试验设计与样品采集

1.2. 样本测试

1.3. 数据分析

2. 结果

2.1. 盐度胁迫对幼鱼血糖含量的影响

2.2. 盐度胁迫对幼鱼天门冬氨酸氨基转移酶(AST)含量的影响

2.3. 盐度适应过程中幼鱼肝脏SOD活性的变化

2.4. 盐度胁迫对幼鱼溶菌酶含量的影响

3. 讨论

3.1. 盐度胁迫对斜带石斑鱼血糖含量的影响

3.2. 盐度胁迫对斜带石斑鱼天门冬氨酸氨基转移酶含量的影响

3.3. 盐度胁迫对斜带石斑鱼肝脏超氧化物歧化酶含量的影响

3.4. 盐度胁迫对斜带石斑鱼溶菌酶含量的影响

第三章 慢性盐度胁迫对斜带石斑鱼鳃NA+/K+-ATP酶活性及氯细胞结构的影响

1. 材料与方法

1.1. 试验设计与样品采集

1.2. 样本测试

1.3. 数据分析

2. 结果

2.1. 盐度适应对斜带石斑鱼鳃丝Na+/K+-ATP酶活性的影响

2.2. 盐度适应对斜带石斑鱼鳃结构的影响

3. 讨论

3.1. 盐度适应对斜带石斑鱼鳃丝Na+/K+-ATP酶活性的影响

3.2. 盐度适应对斜带石斑鱼鳃结构的影响

第四章 慢性盐度胁迫对斜带石斑鱼应激指标的影响

1. 材料与方法

1.1. 试验设计与样品采集

1.2. 样本测试

1.3. 数据分析

2. 结果

2.1. 慢性盐度胁迫对斜带石斑鱼幼鱼血糖含量的变化

2.2. 慢性盐度胁迫对斜带石斑鱼幼鱼天门冬氨酸氨基转移酶(AST)含量的变化

2.3. 慢性盐度胁迫对斜带石斑鱼幼鱼肝脏SOD活性的变化

2.4. 慢性盐度胁迫对斜带石斑鱼幼鱼溶菌酶活性的变化

3. 讨论

3.1. 慢性盐度胁迫对斜带石斑鱼血糖含量的影响

3.2. 慢性盐度胁迫对斜带石斑鱼天门冬氨酸氨基转移酶含量的影响

3.3. 慢性盐度胁迫对斜带石斑鱼超氧化物歧化酶含量的影响

3.4. 慢性盐度胁迫对斜带石斑鱼溶菌酶含量的影响

结论

参考文献

图版Ⅰ

图版Ⅱ

附录1 试液配方及切片步骤

附录2 在读期间研究成果

致谢