大菱鲆在不同温度、盐度及其交互作用下机体生理生化指标

摘要

以大菱鲆幼鱼为研究对象,采用生物化学、分子生物学等技术手段,对温度以及盐度胁迫下的肝脏、肾脏、皮肤、肌肉、血液等多种组织,开展了如抗氧化酶活性分析、同工酶谱分析以及免疫因子的表达分析等生理生化指标的研究。为今后大菱鲆耐温耐盐选育、养殖推广和疾病防治方面的工作,提供科学理论依据。
　　采用两因素交叉分组的方法,设计17℃、20℃、23℃、25℃和28℃五个温度梯度,以及5‰、10‰、20‰、正常盐度(30‰)、40‰五个盐度梯度,在此基础上产生25种温度和盐度组合。研究温度和盐度共同作用对大菱鲆幼鱼活性、存活情况以及体表粘液、血液、鳃以及肝脏中抗氧化酶(SOD、CAT、GP-X)活力的影响。结果表明:在温度与盐度组合为17℃、30以及17℃、20中,大菱鲆幼鱼的摄食积极性以及存活率较高,表明水温和盐度对大菱鲆幼鱼摄食、死亡率有着显著的影响;温度和盐度都能够对大菱鲆幼鱼 SOD、CAT、GP-X活力有显著影响(P<0.05),随着水温升高,肝脏、鳃、血清以及粘液 SOD、CAT与GP-X活力呈折线变,其活力在20℃和23℃时波动较大;整体而言肝脏、鳃、血清以及粘液 SOD、CAT、GP-X在盐度30时活力较低,在盐度5和40时活力较高,其活力随着盐度由30降低而升高,随着盐度由30升高而升高;温度和盐度间的交互作用对肝脏、鳃、血清以及粘液 SOD、CAT、GP-X活力都产生显著影响(P<0.05)。
　　采用聚丙烯酰胺凝胶电泳方法,对在常温(13℃)、20℃、23℃、25℃、28℃以及5‰、10‰、20‰、30‰(对照组)和40‰中的大菱鲆的肝脏、肌肉、鳃、皮肤这四种组织的超氧化物歧化酶、酯酶、苹果酸脱氢酶、谷氨酸脱氢酶的表达情况进行分析。结果显示:在温度和盐度的胁迫下,各组织的同工酶的表达都受到了一定的影响,这种影响基本上都表现为酶带的着色强度的改变。SOD、EST和MDH活性随着温度升高而增加,当温度达到28℃时,活性有所降低;对 GDH的影响则因组织而异;盐度变化时各组织 SOD、EST、MDH以及鳃 GDH活性与对照组相比都表现为增强,肝脏、肌肉、皮肤中的GDH活性则表现为减弱。
　　利用RT-PCR方法,检测在20℃、23℃、25℃、28℃以及5‰、10‰、20‰、30‰、40‰条件下,肝脏、肾脏、皮肤中 IgM、溶菌酶、抗菌肽、凝集素、热激蛋白这几种免疫因子的反应变化情况。结果显示:3种组织中免疫因子的表达量随着温度的变化有着显著的差异;肝脏中各免疫因子的表达量受盐度变化的影响较小,肾脏中各免疫因子的表达量在盐度40中发生极显著变化,皮肤中免疫因子表达量随盐度的改变有显著差异。

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引 言

第一章 文献综述

第一节 我国大菱鲆养殖业的概况

1.1 大菱鲆引进及发展

1.2 大菱鲆养殖生态环境

第二节 温度和盐度对大菱鲆生理生化机制的影响

2.1 抗氧化系统

2.2 同工酶

2.3 免疫系统

第三节 本研究的目的和意义

第二章盐度和温度对大菱鲆幼鱼抗氧化酶活性的影响

引 言

1 材料与方法

2 结果

3 讨论

第三章 温度和盐度胁迫对大菱鲆同工酶表达的影响

1 试验材料与方法

2 结果与分析

3 讨论

第四章 温度和盐度胁迫对大菱鲆不同组织免疫因子的影响

1 试验材料和方法

2 结果

3 讨论

总结

参考文献

硕士期间发表论文

致谢