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长牡蛎遗传结构分析及高糖原含量新品系的甲基化调控机理初探

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摘 要

1 长牡蛎生物学概述

1.1 分类地位

1.2 形态构造

1.3 雌雄同体现象及自交和近交

1.4 摄食习性

1.5 糖原含量相关研究

2 长牡蛎遗传育种研究进展

2.1 选择育种

2.2 杂交育种

2.3 多倍体育种

2.4 分子育种

3 简单重复序列标记

4 表观遗传学及DNA甲基化

4.1 表观遗传学概述

4.2 DNA甲基化技术

4.2.1 DNA甲基化的概念与特点

4.2.2 DNA甲基化的功能

4.3 DNA甲基化研究方法

4.4 DNA甲基化在水产动物中的研究进展

5 本研究的目的和意义

1 实验材料的获取

1.1 亲本的暂养与促熟

1.2 人工授精和孵化

1.3 选优与幼虫培育

1.4稚贝附着与暂养

1.5海上养成

1.6 取样

2 实验方法

2.1 DNA的提取及浓度测定

2.1.1试剂的准备

2.1.2仪器的准备

2.1.3 操作步骤

2.1.4 DNA浓度的测定

2.2 PCR扩增

2.2.1 引物信息

2.2.2 扩增体系及反应程序

2.3 产物检测

2.3.1 1%琼脂糖凝胶电泳检测

2.3.2 聚丙烯酰胺凝胶电泳

2.4 数据统计分析

3 结果

3.1 PCR检测结果

3.2 4个长牡蛎实验组的微卫星遗传多样性

3.3 四个实验组遗传结构分析

3.4 各生长性状指标

4 讨论

4.1 遗传多样性和遗传结构

4.2 生长性状

1 实验材料的获取

1.1 亲本的暂养与促熟

1.2 人工授精和孵化

1.3选优与幼虫培育

1.4稚贝附着与暂养

1.5海上养成

1.6取样

1.7样品处理

2实验方法

2.1 糖原含量测定

2.2 DNA的提取及浓度测定

2.3 MethyRAD 建库及测序

3 数据处理

3.1数据基本处理

3.2甲基化位点在全基因组上的分布

3.3 甲基化测序深度及在基因组不同功能元件上的分布

3.4位点甲基化水平的相对定量

3.5样品间甲基化水平比较

3.6 组间甲基化水平比较

4 结果分析

4.1 牡蛎糖原含量检测结果及差异性检验

4.2 牡蛎基因组检测结果

4.3 甲基化位点在全基因组上的分布和甲基化位点测序深度

4.4 甲基化位点在基因组不同功能元件上的分布

4.5 甲基化位点在基因区的分布

4.6 样品间甲基化水平比较

4.7 组间甲基化水平比较

4.7.1全基因组DNA甲基化差异分析

4.7.2 甲基化水平差异位点在不同基因功能元件上的分布

4.7.3 甲基化水平差异位点的GO富集分析

4.7.4 甲基化水平差异位点的KEGG分析

5 讨论

5.1长牡蛎主要的甲基化模式

5.2 4个家系共有差异甲基化基因分析

5.3 与长牡蛎糖原含量相关的基因、GO、KEGG分析

5.4 牡蛎性腺甲基化遗传与环境分析

5.5 长牡蛎糖原含量甲基化调控机制

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