黄芪、川芎嗪对大鼠局灶性脑缺血缝隙连接蛋白Cx43及行为学的影响

摘要

目的：通过大鼠局灶性脑缺血病理模型分别观察黄芪注射液，川芎嗪注射液，黄芪、川芎嗪注射液合用大、中、小剂量腹腔注射对局灶性脑缺血大鼠缺血区缝隙连接蛋白Cx43表达及行为学的影响。阐明在局灶性脑缺血的治疗中益气活血的中药脑保护作用优于单用益气中药或单用活血中药。探讨益气活血法指导下的益气活血中药干预后的缝隙连接蛋白Cx43的表达及行为学的变化，以揭示益气活血中药在缺血性卒中的一种可能的脑保护机制。
　　 方法：选体重和行为学评分相近的雄性SD大鼠147只，分为空白组(A)，模型组(B)，黄芪注射液治疗组(C)，川芎嗪注射液治疗组(D)，黄芪、川芎嗪注射液合用大剂量组(E)，黄芪、川芎嗪注射液合用中剂量组(F)，黄芪、川芎嗪注射液合用小剂量组(G)。除空白组及模型组外，其余各组均给于药物腹腔注射。给药7天后造模，待大鼠苏醒后给与行为学评分，并分别于1h、12h、24h时间点断头取脑，留取标本，并进行免疫组织化学分析。
　　 结果：益气活血法指导下的益气活血中药黄芪、川芎嗪注射液合用可使大鼠脑组织Cx43表达及行为学得分减少，优于单用益气药黄芪或单用活血药川芎嗪，益气活血中药的脑保护作用优于单用益气药或单用活血药物。
　　 结论：
　　 1、局灶性脑缺血模型的建立简单易行，结果可靠，大鼠行为学改变明显。
　　 2、Cx43在局灶性脑缺血大鼠中的表达从造模后1h开始表达，12h时表达最显著，24h逐渐消失。Cx43是一种具有加速脑缺血损伤的蛋白。
　　 3、由于麻醉药的使用，造模后1h时间点大鼠未苏醒，行为学无法观察；12h时间点黄芪、川芎嗪合用大、中剂量对大鼠行为学的改善明显；24h时间点黄芪、川芎嗪合用大、中、小剂量对大鼠行为学得分的提高均有效。
　　 4、各治疗组均能使Cx43表达下调及大鼠行为学的得分减少，但益气活血药优于益气中药或活血中药。证明两药具有协同作用，这与中医认为缺血性脑卒中病机为气虚血瘀的理论及中医治疗缺血性脑卒中常采用益气活血药物配伍并用的治则相符，因次对于局灶性脑缺血，益气活血法优于活血化瘀法。
　　 5、通过对大鼠局灶性脑缺血缝隙链接蛋白Cx43表达及行为学的观察测定，得出黄芪加川芎嗪大剂量组效果优于中、小剂量组，推测疗效与中药的剂量有关。最佳剂量有待于进一步研究。

目录

文摘

英文文摘

声明

引言

理论探讨

1.中医学对缺血性中风的认识

1.1病名

1.2病因病机

1.3辨证分型

1.4中医学对缺血性中风的治疗

2.西医学对缺血性卒中的认识

2.1病因、发病机制及病理变化

2.2治疗

3.Cx43与缺血性卒中

3.1缝隙连接蛋白

3.2研究现状

实验研究

1.实验目的

2.实验材料

2.1实验动物

2.2实验药品及仪器

3.实验方法

3.1实验流程

3.2实验分组

3.3术前给药方法

3.4模型制备

3.5行为学评分

3.6免疫组织化学染色

4.标本采集和指标检测

4.1大鼠行为学观察

4.2 Cx43指标检测

4.3统计学处理

5.实验结果

5.1造模情况

5.2对大鼠行为学评分的影响

5.3 Cx43的测定

6.讨论

6.1动物模型制备的讨论

6.2实验过程的讨论

6.3气虚血瘀与缺血性中风

6.4黄芪、川芎在现代药理学中的研究

6.5给药方法的选择

6.6 Cx43、行为学与局灶性脑缺血

6.7局灶性脑缺血模型与气虚血瘀模型

6.8黄芪、川芎嗪的血药浓度

6.9小结

结语

参考文献

附录：Cx43阳性表达（400倍）

致谢