中药血竭化学模式识别及α-葡糖苷酶抑制成分亲和筛选研究

摘要

建立了十种血竭样品的高效液相色谱(HPLC)、红外光谱(IR)及荧光光谱(LS)三类化学指纹图谱,并把指纹图谱进行数据化及数据标准化处理.利用重叠率或相关系数对十种血竭样品进行相似性评价.在此基础上用统计分析软件SPSS11.0对十种血竭样品进行系统聚类分析.结果表明:三类化学指纹图谱的聚类结果一致,均能很好地对中药血竭进行系统分类及真伪鉴别.从而实现了指纹图谱的信息化,并建立了中药血竭化学分类模式识别方法.用不同的溶剂提取法及硅胶层析法得到中药血竭各种提取物,对这些提取物进行HPLC分析及酶活性分析,可得到HPLC图谱数据及酶活性数据.据此建立了中药血竭α-葡萄糖苷酶抑制成分的多元线性回归模型,并用逐步回归法筛选了对α-葡萄糖苷酶活性有影响的成分,从统计学意义上解释了各成分之间的相互作用.实现了中药指纹图谱的知识化,为中药指纹图谱中的化学信息与药效信息相关关系的研究提供了一种很好的方法和思路.结合逐步回归法和两种亲和筛选法的筛选结果可以分析出中药血竭指纹图谱中α-葡萄苷酶抑制成分.三种方法分析的结果表明:HPLC指纹图谱中保留时间为24.0min的组分为α-葡萄糖苷酶抑制成分,可作为降血糖新药开发的目标化合物.保留时间为17.0min、18.0min的组分对酶活性也有影响,从酶活性与指纹图谱上来看,二者结构与功能上具有一定关系,值得进一步进行分离提取,研究酶抑制剂作用的机理.保留时间为21.8min的组分对酶有亲和作用,这种作用为激活或抑制尚待进一步研究.保留时间为4.1min、6.5min、5.0min、50.3min的组分可能对酶活性有作用,但尚不能确定.可以断定,在中药血竭HPLC图谱中,除了以上讨论组分的峰以及保留时间为3.0min的进样峰与保留时间为8.3min的杂质峰外,其余的峰所代表的组分均非α-葡萄糖苷酶抑制成分.

目录

文摘

英文文摘

原创性声明及本论文使用授权说明

第一章综述

1.引言

2.中药质量评价与化学模式识别

2.1中药质量评价产生的根源

2.2中药质量评价的发展历史

2.3中药质量评价的发展现状

2.4化学模式识别的概念与内涵

2.5化学模式识别在中药质量评价中的应用进展

3.中药有效成分研究与亲和筛选技术

3.1中药有效成分的概念与内涵

3.2中药有效成分研究的思路与方法

3.3亲和筛选法筛选组合化学库中新药先导化合物研究进展

4.中药血竭的研究概况

4.1中药血竭的研究历史

4.2中药血竭的研究现状

4.3本实验室对血竭的研究进展

5.本课题研究思路

第二章.实验部分

1.实验材料与试剂

1.1实验材料

1.2试剂

2.实验仪器及设备

3.实验方法与步骤

3.1中药血竭指纹图谱的获取

3.2酶及其抑制剂活力的定义与测定

3.3硅胶层析法分析中药血竭活性成分

3.4亲和筛选法分析中药活性成分

第三章.实验结果与讨论

1.中药血竭的化学模式识别研究

1.1中药血竭的化学分类鉴别模式研究

1.2中药血竭化学信息与药效信息相关模型研究

2.中药血竭α-葡萄糖苷酶抑制成分的亲和筛选研究

2.1基于固定化酶的亲和筛选法

2.2亲和超滤筛选法

2.3关于α-葡萄糖苷酶抑制成分筛选的结论

第四章全文结论与创新之处

1.1全文结论

1.2论文的创新之处

参考文献

作者攻读学位期间公开发表的学术论文

致谢

论文说明