苦瓜中α-葡萄糖苷酶抑制成分及其降血糖活性研究

摘要

近年来糖尿病的发病率正在逐年上升，已成为危害人类健康的主要疾病之一。苦瓜作为一种药食两用植物，在降低和控制糖尿病人的血糖方面具有显著功效。因此从苦瓜中分离和筛选具有降血糖作用的活性组分并对其降糖机理进行初步探讨具有重要意义。 本文从酶学角度出发，寻找苦瓜中对α-葡萄糖苷酶和醛糖还原酶有抑制作用的活性成分，提取和筛选得到了具有显著α-葡萄糖苷酶抑制活性和醛糖还原酶抑制活性的物质A和仅具有α-葡萄糖苷酶抑制活性的物质B。动物实验显示：两种物质均能明显降低正常小鼠和四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖水平及提高四氧嘧啶糖尿病小鼠的肝糖原和心肌糖原含量。 活性物质分离提取的工艺路线为：70％乙醇冷浸，再依次用石油醚和正丁醇萃取，其中正丁醇相经过硅胶柱色谱进一步纯化得到两种具有一定纯度的活性组分物质A和物质B，经HPLC检测纯度分别为84.40％和93.50％。物质A和物质B经初步定性分别为皂甙类物质和甙类物质，其收率分别为0.12％和0.30％。酶促反应动力学实验表明：物质A对α-葡萄糖苷酶为竞争性抑制，比活力为525 U/mg，Km=0.394mmol/L，Ki=15.32μg/mL；物质A对醛糖还原酶为竞争性抑制，比活力为104 U/mg，Km=109.2mmol/L，Ki=64.82μg/mL；物质B对α-葡萄糖苷酶为竞争性抑制，比活力为1700 U/mg，Km=0.313mmol/L,Ki=1.19μg/mL。正常小鼠给药实验表明，物质A和物质B对正常小鼠均有降血糖作用，并且确定120mg/kg为最佳给药剂量。四氧嘧啶小鼠连续给药实验表明，物质A和物质B对四氧嘧啶糖尿病小鼠均有明显的降血糖作用，其中物质B的降糖效果接近市售拜糖苹。体内α-葡萄糖苷酶和醛糖还原酶活性实验表明，物质A能明显降低四氧嘧啶糖尿病小鼠体内醛糖还原酶活性，而物质B能明显降低四氧嘧啶糖尿病小鼠体内α-葡萄糖苷酶和醛糖还原酶活性。此外，物质A和物质B均能明显提高四氧嘧啶小鼠的肝糖原和心肌糖原含量。 这项研究工作的意义在于通过分离筛选得到了具有降血糖作用的活性物质，为新一代降糖药物的开发奠定了坚实的基础。

目录

文摘

英文文摘

原创性声明及本论文使用授权说明

第一章综述

第二章试剂与仪器

第三章实验方法

第四章实验结果与讨论

第五章结论与展望

参考文献

附录：拜糖苹的酶学性质

作者在攻读硕士学位期间公开发表的论文

致谢