去糖基化对电压门控钠通道rNav1.2/rNav1.3的电生理功能修饰

摘要

包括离子通道在内的大部分细胞膜蛋白都以糖蛋白的形式行使其生物学功能。rNav1.2和rNav1.3是两种中枢神经系统的电压门控钠通道亚型，作为一种复杂的细胞膜糖蛋白，糖基化是否会对其性质与功能造成影响至今鲜有报道。 本工作从细胞膜糖蛋白的视角，首次利用衣霉素(一种天然的糖基化抑制剂，在蛋白质糖基化的研究中被普遍使用)抑制表达在非洲爪蟾卵母细胞中的rNav1.2和rNav1.3的糖基化，用双电极电压钳技术研究了去糖基化对两者电生理性质的影响，以及东亚钳蝎神经毒素BmK I(一种钠通道特异性调制剂)对糖基化/去糖基化rNav1.2的调制效应。结果显示： 1.去糖基化对rNav1.2和rNav1.3的影响呈现亚型特异性。去糖基化后，rNav1.3的电压依赖性激活曲线向去极化方向移动了约10mV，稳态失活的电压依赖性曲线向超极化方向移动了约8mV：rNav1.2的电压依赖性激活曲线向超极化方向移动了约7mV，而对稳态失活的电压依赖性曲线没有明显影响。 2.BmK I对糖基化/去糖基化rNav1.2呈现差异性调制效应。BmK I对糖基化rNav1.2没有明显的调制作用，但是使得去糖基化rNav1.2的电压依赖性激活曲线向去极化方向移动了约10mV，然而对于电压依赖性失活也没有明显影响。 本工作提示，糖基化可使电压门控钠通道门控性质的调节更具多样性;并且首次提出，糖基化可能是影响钠通道与其特异性调制剂相互识别的重要因素之一。

目录

文摘

英文文摘

声明

第1部分绪论

第1章研究背景

1.1一个新兴学科--“糖生物学”概念的提出与学科发展

1.2电压门控钠通道：一种复杂的生物膜糖蛋白

1.3糖生物学研究的主要工具之一：特异性的糖基化抑制剂

1.4良好的离子通道外源表达体系：非洲爪蟾卵母细胞

1.5离子通道电生理研究的有力手段：双电极电压钳

第2部分实验正文

第2章去糖基化作用对电压门控钠通道rNav1.3电生理性质的影响

前言

材料和方法

实验结果

第3章Bmk I对糖基化／去糖基化电压门控钠通道rNav1.2的差异性调制效应

前言

材料和方法

实验结果

第3部分讨论与展望

第4章实验结果讨论

第5章工作展望

参考文献

作者在攻读硕士学位期间公开发表的论文

作者在攻读硕士学位期间所参与的项目

致谢