I-咪唑啉受体介导胍丁胺对吗啡依赖的调节

摘要

尽管以前研究表明胍丁胺能够抑制吗啡依赖,但其作用机制尚不明确.该文旨在首次提供直接证据以阐明I<,1>-咪唑啉受体是否介导了胍丁胺对吗啡依赖的调节,并探讨I<,1>-咪唑啉受体在受体后水平抑制吗啡依赖的可能分子机制.首先建立了共同稳定表达μ阿片受体(MOR)和I<,1>-咪唑啉受体(I<,1>R)的CHO细胞表达系统(CHO-μ,CHO-μ/I<,1>细胞).表达的MOR和I<,1>R的B<,max>值分别是1.83±0.13 pmol/mg蛋白和43.59±6.83 fmol/106细胞.吗啡长时程处理CHO-μ和CHO-μ/I<,1>细胞,纳洛酮催促引起显著的cAMP超射和[Ca<'2+>]<,i>升高,形成吗啡依赖/戒断的细胞模型.胍丁胺低浓度(0.01-2.5μM)时通过作用于I<,1>R而抑制吗啡长期处理cAMP超射的形成,高浓度胍丁胺(5-100μM)可能通过激活I<,1>R和阻断L-型Ca<'2+>通道而抑制cAMP超射的形成;而对吗啡依赖状态下cAMP通路超敏的表达没有影响.胍丁胺通过作用于I<,1>R而显著抑制吗啡长期处理Ca2+信号通路适应性上调的形成;对吗啡依赖状态下Ca<'2+>信号通路功能上调的表达也有一定的抑制作用.胍丁胺(1μM、3μM)激活I<,1>R对吗啡依赖状态下戒断时ERK2、CREB磷酸化水平升高和c-Fos表达增强有抑制作用.综上所述,该文在国内外首次建立了共同稳定表达MOR和I<,1>R的哺乳动物细胞表达系统;首次提供了胍丁胺通过作用于I<,1>R而抑制吗啡依赖的直接实验证据,其分子机制可能主要是胍丁胺激活I<,1>R抑制cAMP通路和Ca<'2+>信号通路代偿性适应的形成,通过cAMP通路和Ca<'2+>信号通路的整和而影响转录因子CREB和c-Fos转录活性,进而改变基因表达.胍丁胺-I<,1>R作用系统抑制吗啡依赖主要是在依赖的形成,而对表达的影响较小.

目录

摘要

ABSTRACT

缩略语

前言

材料与方法

结果

一、μ阿片受体和Ⅰ1-咪唑啉受体在CHO细胞中的共同稳定表达

二、Ⅰ1R介导胍丁胺对吗啡依赖的调节

讨论

一 共同稳定表达MOR和Ⅰ1R的细胞模型(CHO-μ/I1细胞)的建立

二 Ⅰ1R介导胍丁胺对吗啡依赖的调节及可能的分子机制

三 高浓度胍丁胺抑制吗啡依赖细胞cAMP超射的非Ⅰ1R依赖的机制

四 Ⅰ1R内源性配体胍丁胺和经典激动剂莫索尼定、利美尼定对阿片依赖调节的差异

结论

参考文献

致谢

个人简历

综述 阿片依赖病理过程中NMDA受体与阿片受体的相互作用及分子机制