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【6h】

用膜片钳技术分析苯环壬酯在烟碱受体上的作用位点

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目录

缩略语表

前言

材料和方法

1新生大鼠交感神经元、海马神经元和骨骼肌细胞的分散和培养

2玻璃微电极制备

3记录液

4全细胞记录

5药物和给药方法

6数据的采集和分析

实验结果

第一部分苯环壬酯在交感神经元烟碱受体上的作用位分析

1培养的交感神经元的形态观察

2交感神经元上的电压门控离子通道电流

3交感神经元上的烟碱诱发电流

4交感神经元上的自发性突触后电流

5抗胆碱药抑制烟碱诱发电流作用的浓度依赖性

6抗胆碱药抑制烟碱诱发电流的动力学特点

7抗胆碱药对交感神经元烟碱受体失敏的影响

8抗胆碱药抑制交感神经元烟碱诱发电流作用的电压依赖性

9抗胆碱药抑制烟碱诱发电流作用的使用依赖性

10苯环壬酯在交感神经元烟碱受体上的作用位点分析

第二部分苯环壬酯在骨骼肌细胞烟碱受体上的作用位点分析

1培养的骨骼肌细胞的形态观察

2细胞上的电压门控离子通道电流

3肌球上的烟碱诱发电流

4电流幅度的浓度依赖性(烟碱的量效关系)

5抗胆碱药抑制烟碱诱发电流的浓度依赖性

6抗胆碱药对骨骼肌烟碱受体失敏的影响

7抗胆碱药抑制烟碱诱发电流作用的电压依赖性

8抗胆碱药抑制烟碱诱发电流作用的使用依赖性

9抗胆碱药在骨骼肌细胞烟碱受体上的作用位点

第三部分苯环壬酯在海马神经元上的作用位点分析

1培养的海马神经元的形态观察

2海马神经元的电压门控离子通道电流

3苯环壬酯对海马神经元电压门控离子通道电流的作用

4海马神经元的自发性突触后电流及谷氨酸的作用

5烟碱对海马自发性突触活动的影响

6烟碱受体阻断剂对烟碱在海马神经元上的作用的影响

7苯环壬酯对海马神经元自发性突触活动的影响

8苯环壬酯在海马神经元上的作用分析

讨论

1关于培养不同细胞的不同要求

2用膜片钳研究烟碱受体

3用膜片钳研究药物在烟碱受体上的作用位点的系统方法

4苯环壬酯在交感神经元和骨骼肌烟碱受体上的作用位点

5苯环壬酯在海马神经元烟碱受体上的作用位点

结论

论文参考文献

综述:烟碱受体的变构调节和变构调节剂

1烟碱受体概述

2烟碱受体的变构调节

3烟碱受体变构调节的位点

4烟碱受体的变构调节剂

5结语

6参考文献

致谢

个人简历

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摘要

为了阐明苯环壬酯对烟碱受体的作用,该实验用膜片钳全细胞记录技术,以培养的颈上神经节交感神经元细胞、骨骼肌细胞和中枢海马神经元细胞为标本,观察了烟碱在交感神经元和骨骼肌细胞的诱发电流以及烟碱对海马兴奋性突触后电流的影响.在此基础上,以美加明和二氢-β-刺桐啶碱为对照,以烟碱诱发电流为指标,观察了苯环壬酯对交感神经元烟碱受体和对骨骼肌烟碱受体拮抗作用的受体动力学特征、对烟碱受体失敏的影响以及苯环壬酯抑制作用的电压依赖性和使用依赖性,并根据结果分析了苯环壬酯在交感神经元和骨骼肌烟碱受体上的作用位点.在海马神经元上,通过观察谷氨酸、烟碱、苯环壬酯对自发性突触后电流(sEPSC)、微突触后电流(mEPSC)的影响,分析了苯环壬酯拮抗海马神经元烟碱受体的作用部位.

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