一氧化氮在绿豆下胚轴不定根发生过程中的作用研究

摘要

该文以绿豆下胚轴为材料,从不同角度研究了NO在不定根发生中的作用以及IBA、NAA诱导不定根发生的机制,并对不定根发生过程中NO的来源进行了探讨.结果如下:1.NO供体SNP可有效促进插条生根,其最适浓度为300μmol/L,浓度高时则具有伤害效应.SNP处理时间、苗龄及插条处理位置都影响生根效果.从5天龄幼苗子叶节下6cm处切取的插条,以300μmol/LSNP处理24小时生根效果最好.SNP与IBA或NAA混合处理比各自单独处理的生根效果好.NO清除剂c-PTIO和动物NOS抑制剂L-NAME单独或与IBA和NAA混合处理明显抑制插条生根,表明内源NO在不定根形成中可能起着重要作用,其来源与NOS有关.2.利用NO特异的荧光探针对对照及IBA和NAA处理插条生根过程中内源NO的时空变化进行了检测.结果表明,无论对照还是IBA或NAA处理插条,伴随着根原基的发育,插条基部2mm区域NO荧光从无到有逐渐增强,36h主要分布于维管组织之间不定根发生区域,48h后则主要分布于根原基前端分生组织中.非生根区域无NO荧光.对照与IBA或NAA处理插条基部2mm-5mm区域NO产生及分布则完全不同,在实验期间对照插条该区域无NO产生,而IBA或NAA处理插条该区域NO产生、分布及随时间变化趋势与对照插条基部2mm区域基本一致.NO清除剂c-PTIO抑制所有处理插条的根原基形成.这些结果显示,内源NO在不定根形成中起重要作用,而且IBA和NAA诱导的不定根发生也是由NO介导的.3.NADPH-黄递酶为NOS标志酶,该文以该酶组织化学法对不定根发生过程中的类似动物NOS活性进行了检测.结果表明,O-60h,无论对照还是IBA或NAA处理插条,伴随着根原基的发生和发育,插条基部2mm区域NADPH-黄递酶活性逐渐增强,且集中分布在维管组织之间根原基发生区域及正在形成的根原基中,其它非生根区域基本无阳性反应.在根原基中较强阳性也集中分布于分生组织中,这与NO的分布一致.与对照相比,相同时间IBA或NAA处理的插条NADPH-黄递酶阳性反应略强.

目录

文摘

英文文摘

本文缩写

引言

1文献综述

1．1 生物体内的N0

1．1．1m的理化性质

1．1．2动物体内的N0

1．1．3植物体内的m及其生理功

1．2不定根发生过程及其激素调控

1．3本研究的目的和意义

2．材料与方法

2．1供试材料

2．1．1植物材料

2．1．2主要化学试剂及仪器

2．2方法

2．2．1绿豆下胚轴插条生根的诱导

2．2． 2 NADPH一黄递酶活性检测

2．2．3内源N0荧光检测

3．结果与分析

3． 1 SNP等对绿豆下胚轴插条生根的影响

3．1．1snp对绿豆下胚轴插条生根狗影响

3．1． 2 SNP与1BA、NAA混合处理乃不定根发生的影响

3．1．3L一NAME和c一pTI0对生根的影响

3.2不定根发生过程中NADPH黄递酶的变化

3．2．1对照插条NADpH一黄递酶的变化

3．2．2.1BA和NAA处理对NADPH一黄递酶变化的影响

3．2．3L一NAME处理的效应

3．3不定根发生过程中内源m的产生和分布

3．3．1内源N0的产生和分布

3．3．2 1BA对N0产生和分布的影响

3．3． 3 NAA对N0产生和分布的影响

3．3．4L一NAME处理的效应

3．3．5C一pTI0处理的效应

4．讨论

4．1外源m对插条生根的影响

4．1．1SNP浓度对绿豆下胚轴生根的影响

4．1．2SNP处理时间对生根的影响

4．1．3苗龄及处理位置对生根的影响

4．1．4SNP与1BA和NAA混合使用对生根的影响

4．2内源N0在不定根发生过程中的作用

4．3 1BA和NAA诱导生根过程中N0的作用研究

4．4不定根发生过程中N0的来源

4．5 1BA和NAA诱导生根过程中N0的来源

总结

致谢

参考文献

中英文图版说明及图版

攻读学位期间的研究成果