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人脐血造血干祖细胞的体外三维培养和大量扩增

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前言

材料

脐血

骨髓

微载体

IMDM培养基

胎牛血清

细胞因子

CD34抗体

其它主要试剂

主要仪器设备

计算机软件

方法

基础培养液

脐血单个核细胞的分离

骨髓基质细胞的分离、培养

集落形成单位分析(CFU-C,包括BFU-E、CFU-GM、CFU-GEMM)

CD34细胞表型的分析

微载体的处理

脐血造血干祖细胞体外三维培养系统及其二维平面对照培养系统的构建

脐血造血细胞体外不加细胞因子三维培养的方法及分析时细胞的收集和处理

试剂配制

结果

脐血造血干祖细胞体外扩增的条件及脐血造血干祖细胞的大量扩增

SCF、IL-3、IL-6三种细胞因子的浓度优化

静置培养时不同细胞接种密度、不同换液方案对脐血造血细胞扩增的影响

悬浮搅拌培养时不同细胞接种密度对扩增的影响

脐血造血干祖细胞的悬浮搅拌培养

脐血造血干祖细胞的大量扩增

脐血造血干祖细胞的体外三维培养

脐血造血干祖细胞体外不加细胞因子的三维培养

脐血造血干祖细胞与骨髓基质细胞在加细胞因子条件下的三维培养

讨论

结论

致谢

参考文献

综述

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摘要

造血干祖细胞的体外培养和扩增在造血调控、干细胞生物学和临床移植中具有重要的意义.该论文通过研究SCF、IL-3、IL-6三咱细胞因子的不同组合、细胞接种密度、换兴方案和培养方式对脐血造血细胞扩增的影响,建立了脐血造血干祖细胞大量扩增的悬浮培养体系和三维固定化培养系统.

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