新型Ca荧光探针STDBT胞质、胞核Ca同时测定研究

摘要

本论文采用我们实验室自行合成的核、质双标的新型Ca2+荧光探针STDBT同时标记胞核和胞质，进行了不同激动剂刺激后胞核Ca2+和胞质Ca2+的同时测定，探讨了其调节机制，为细胞胞质、胞核Ca2+信号转导机制研究提供了有意义的参考。 采用激光共聚焦显微术，应用核、质双标的新型Ca2+荧光探针STDBT标记大鼠心肌细胞，探讨了5-HT诱导大鼠心肌细胞核[Ca2+]n和胞质[Ca2+]c动员的机理。应用双靶向性新型Ca2+荧光探针STDBT负载大鼠心肌细胞，结合激光共聚焦显微镜，研究了大鼠心肌细胞胞核[Ca2+]n和胞质[Ca2+]c的调节机制。 应用新型Ca2+荧光探针STDBT负载大鼠心肌细胞，结合激光共聚焦显微镜，在亚细胞水平探讨IGF-1诱导胞质[Ca2+]c和胞核[Ca2+]n升高的机制。

目录

文摘

英文文摘

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第一章概述

1.1引言

1.2胞内Ca2+的分布及其信使作用

1.3 Ca2+荧光探针法

1.3.1发光蛋白法

1.3.2小分子Ca2+荧光探针法

1.4亚胞内游离Ca2+的测定研究进展

1.4.1膜Ca2+的测定研究

1.4.2内质网Ca2+的测定研究

1.4.3线粒体Ca2+的测定研究

1.4.4胞核Ca2+的测定研究

1.5本论文的主要研究内容

第二章STDBT用于5-HT诱导心肌细胞钙动员的机制研究

2.1引言

2.2材料与方法

2.2.1试剂

2.2.2心肌细胞的分离

2.2.3细胞Ca2+荧光探针标记

2.2.4实验分组及检测方法

2.2.5数据分析

2.3结果

2.3.1细胞荧光图像观察

2.3.2 5-HT诱导的大鼠心肌细胞胞核、胞质Ca2+变化机理研究

2.4讨论

2.5结论

第三章STDBT用于大鼠心肌细胞胞核Ca2+和胞质Ca2+的调节机理研究

3.1引言

3.2材料与方法

3.2.1试剂

3.2.2心肌细胞的分离

3.2.3细胞Ca2+荧光探针标记

3.2.4实验分组及检测方法

3.2.5数据分析

3.3结果

3.3.1细胞荧光图像观察

3.3.2心肌细胞胞核Ca2+和胞质Ca2+的调节机理研究

3.4讨论

3.5结论

第四章IGF-1对心肌细胞核钙、质钙调节机制研究

4.1引言

4.2材料与方法

4.2.1试剂

4.2.2心肌细胞的分离

4.2.3细胞Ca2+荧光探针标记

4.2.4实验分组及检测方法

4.2.5数据分析

4.3结果

4.4 讨论

4.5结论

总结

参考文献

致谢

攻读学位期间的研究成果