药用植物绞股蓝种质资源研究

摘要

绞股蓝Gynostemmapentaphyllum(Thunb)Makino，葫芦科多年生攀缘草质藤本植物，全草入药。我国民间用绞股蓝强身益寿的历史源远流长，早在明代《救荒本草》、《农政全书》、《本草纲目》中就有记载。1986年国家科委将绞股蓝为“名贵中草药”列入“星火计划”。现代药理研究表明，绞股蓝能有效的改善血脂代谢、降低血脂血糖水平并具有抗疲劳和延长细胞寿命、抗氧化、抗衰老、抗肿瘤、抗癌、镇静、催眠、止痛等广泛的药理作用，加之绞股蓝又多产于陕西南部及长江以南地区，因此，它又被冠以“南方人参”之称。 绞股蓝在我国的分布比较广泛，但其储量远远不够资源开发的需要，且由于过量采集，野生资源已不断减少，因此国家林业局保护司已经把绞股蓝列为国家二级保护植物。开展绞股蓝种质资源研究是进行有效资源保护以及绞股蓝品种选育、遗传理论研究、生物技术研究和农业生产的重要物质基础。制定统一的绞股蓝种质资源规范标准，有利于整合全国绞股蓝种质资源，规范绞股蓝种质资源的收集、整理和保存等基础性工作，创造良好的资源和信息共享环境及条件；有利于有效地保护和高效地利用绞股蓝种质资源，充分挖掘其潜在的药用、经济、社会和生态价值，促进全国绞股蓝种质资源研究工作的有序、高效发展。 本研究在对我国几大主产区绞股蓝种质资源调查收集的基础上，就其形态学特征和品质特性进行相关研究后对绞股蓝形态学分化多样性进行了探讨，对不同种质资源进行了评价，并在分子水平上建立了绞股蓝种质资源的DNA指纹图谱，最终制定了绞股蓝种质资源的数据描述规范标准。实验结果如下： 1)对国内绞股蓝主产区的野生绞股蓝资源及人工栽培绞股蓝资源进行全面细致调查及收集。包括对其地理因子、生态环境、种质特性等进行深入考察。在考察的基础上，总结了绞股蓝资源利用现状，指出了绞股蓝资源利用的现存问题并提出了相应解决对策。 2)从根、茎、叶、花、果实及种子等形态学特征详细研究绞股蓝各种质资源的差异，并进行相关方差分析和聚类分析，进而综合统计及评价不同种质之间的差异，探讨其形态分化多样性和遗传多样性。方差分析结果显示，在12个性状特征值中，有5个性状特征达到了差异显著水平(P＜0.05)，占41.6％，其中，小叶长宽比、表皮毛数目、种子大小均达到了差异极显著(P＜0.01)水平，因此，可将这些显著差异性状作为探讨绞股蓝种质资源形态分化的重要生物学性状。 3)研究各种质资源的品质性状并进行系统比较，全面进行资源评价。综合分析各种质资源品质和质量以及结合其各项生长指标，提出了可作为后续绞股蓝良种选育研究的一些优良绞股蓝种质资源。 4)以RAPD分子标记技术构建绞股蓝DNA指纹图谱。本研究以不同类型绞股蓝DNA为模板，进行RAPD反应条件的优化及RAPD结果分析。最终筛选的RAPD反应条件为：20μlPCR反应体系中包括了10×buffer2.0μl，Mg2+2.0mM，dNTP0.2mmolL-1，引物0.5mmolL-1，Taq酶1U，模板DNA50ng。反应程序为94℃3min→(94℃30s→38℃40s→72℃1min)45个循环→72℃10min→4℃保持。进而从66个随机引物中筛选出了5个多态性好的引物作为绞股蓝的RAPD分子标记随机引物，并进一步对各种质资源RAPD扩增结果的多态性和特征性条带进行识别，建立了绞股蓝分子标记识别表和绞股蓝分子标记检索表，并计算了其基因型相似系数，利用欧氏距离进行系统聚类分析，从而全面构建绞股蓝DNA指纹图谱。 5)综合绞股蓝各种质资源的地理分布特征、形态学特征、品质特性、分子标记特征等各方面的数据，参照相关种质资源制定的原则和方法，制定了绞股蓝种植资源描述规范和数据标准，为全面的开发全国绞股蓝资源提供了基础。

目录

文摘

英文文摘

学位论文独创性声明及学位论文使用授权声明

第一章绪论

第二章绞股蓝种质资源分布状况调查研究

第三章绞股蓝种质资源生物学性状的研究

第四章绞股蓝种质资源的分子标记研究

第五章绞股蓝种质资源描述规范和数据标准

第六章总结

参考文献

附录

致谢

攻读学位期间的研究成果