自体表皮细胞和同种异体无细胞真皮基质用于修复皮肤缺损的实验研究

摘要

皮肤组织工程为改善创面修复质量，解决皮源问题带来了新的希望。复合移植真皮支架材料与自体刃厚皮片、培养的表皮细胞膜片，既可以缩短供皮区愈合时间和减少瘢痕形成，又可以克服薄皮片移植后皮片挛缩、色素沉着的缺陷，还可提高柔韧度，从而改善创面愈合后的外观和功能。组织工程皮肤主要涉及三个方面的内容：种子细胞的来源、真皮支架的制备以及细胞因子的添加。其中无细胞真皮基质的研发是组织工程皮肤支架材料研究中的一个热点。除去真皮内细胞有较多方法，已商品化的产品存在一些缺陷。 本研究在已有的工作基础上，首次采用高渗盐-NaOH消蚀法制备无细胞真皮基质(AcellulardermalmatrixADM)，初步研究其生物学性能，为其在临床上的应用提供理论和实验依据。研究结果表明采用高渗盐-NaOH消蚀法制备的ADM，保留完整的胶原纤维支架结构；细胞毒性小于1级，在ADM上接种成纤维细胞，发现FB可以较为均匀地分布在ADM的天然孔隙中，有较好的活力；生物相容性实验结果表明宿主成纤维细胞能够在ADM上浸润生长，血管化明显；这些结果都与我国医疗器械生物学评价的要求相一致。通过高渗盐-NaOH消蚀法制备的ADM，由于制备过程简便，有较好临床推广应用前景。此外，我们还探索了皮肤组织工程中种子细胞的培养、鉴定方法。该研究将会极大推动组织工程方法在修复皮肤缺损中的应用。

目录

缩略词表

引 言

第一部分：成人皮肤成纤维细胞的培养和鉴定

第二部分：成人表皮细胞的培养和鉴定

1.材料

2.方法

3.结果

3.1有血清培养体系

3.2无血清培养体系

4讨论

第三部分：同种异体无细胞真皮基质的研制及鉴定

实验一大鼠无细胞真皮基质的研制

实验二大鼠无细胞真皮基质生物相容性的研究

实验三人无细胞真皮基质的生物学特性的研究

1.材料

2.方法

3.结果

4讨论

实验四成纤维细胞在无细胞真皮基质上成活特性的研究

1.材料

2.方法

3.结果

4讨论

总结

参考文献

综述皮肤组织工程与创伤修复重建

一、种子细胞的培养、扩增、应用

二、真皮支架材料研制与应用

三、分子生物学技术在组织工程皮肤中的应用

四、问题和展望

参考文献

致 谢

博士期间工作和已发表论文

同种异体人脱细胞真皮基质的细胞相容性

真皮支架材料的研究进展