利用乳酸乳球菌表达口服鼠疟疾疫苗

摘要

疟原虫裂殖子表面蛋白1(MSP-1)在疟原虫侵入红细胞过程中起到关键作用.该论文构建了分泌表达P.yoeli 265BY株MSP-1-19的重组乳酸乳球菌(Lactococcus lactis),并且通过灌胃口服方法免疫BALB/c以及C57BL/6小鼠.经过4周7次口服后,用红内期P.yoeli265BY株攻击感染经免疫的BALB/c(每次口服剂量5×10<'9>个重组细菌)以及C57BL/6(每次口服剂量5×10<'9>/1×10<'8>个重组细菌)小鼠,其平均峰值虫血率分别为0.6﹪和20.8﹪/41.6﹪,而相应的对照组则分别达到16.0﹪和60.8﹪.实验结果说明通过灌胃口服乳酸球菌活菌疫苗免疫是抵抗疟疾的有效途径,并且表明口服剂量对免疫效果有着显著影响.

目录

第一部分综述

1.疟疾及其疫苗

1.1疟原虫的生活史

1.2疟疾疫苗的研究可行性

1.3疟疾疫苗的主要作用阶段

1.4细胞因子对疟疾免疫的调控和作用

1.5疟疾疫苗研究现状与展望

2.乳酸细菌表达体系

2.1组成型表达体系

2.2调控型表达体系

2.3蛋白运输体系

2.4结论

第二部分论文正文

前言

材料与方法

一、 材料

二、方法

结果

1.MSP-1-19基因的克隆构建及序列测定

2.pSK-PsGT以及pL2-PsGT的构建

3.pGEX-MSP1-19的构建及其表达

4.免疫印迹法鉴定乳酸乳球菌及大肠杆菌的表达

5.乳酸乳球菌在小鼠体内的存活曲线

6.口服免疫后对小鼠的感染实验结果

讨论

1.P.yoelii MSP-1-19的多态性

2.疟原虫基因密码的偏爱性及其在原核生物中的表达

3.虫血率—时间曲线分析

4.本实验今后工作的展望

致谢

参考文献