肝细胞性肝癌中端粒酶与肿瘤抑制基因p53相关性研究

摘要

目的:研究端粒酶/hTERT(human telomerase reverse transcriptase)在人肝细胞肝癌(HCC)发生、发展中的意义,探讨其在HCC诊断中的价值;观察肿瘤抑制基因p53对人肝癌细胞端粒酶及其催化亚单位hTERT的影响,以期为以端粒癌细胞端粒酶及其催化亚单位hTERT的影响,以期为以端粒酶/hTERT为靶点的肿瘤治疗提供实验依据.结论:1.端粒酶活性、hTERTmRNA表达在HCC中的高检出率以及与某些肿瘤特征的密切关系,提示hTERT原位检测可望成为HCC早期诊断和预后判断的有用指标;2.p53失活、端粒酶活化/hTERT表达共同参与HCC发生发展过程;3.端粒酶/hTERT活化表达存在p53依赖性调控途径,但与p21WAF1无关;4.野生型p53基因转染能抑制肿瘤细胞端粒酶活性/hTERTmRNA表达和引起细胞凋亡,为肿瘤基因治疗提代新依据.

目录

文摘

英文文摘

前言

第一部分人体组织材料的研究人HCC及癌旁组织中端粒酶活性/hTERTmRNA和p53蛋白检测及其相关性分析

材料与方法

1.标本来源及病理资料

方法

结果

1.组织内端粒酶活性

2.组织内hTERTmRNA原位杂交

3.p 5 3免疫组化染色

4.p21WAF1免疫组化染色

讨论

第二部分体外研究脂质体介导野生型p53基因转染对人肝癌细胞株端粒酶活性、hTERT表达的影响

材料与方法

材料

方法

结果

1.转染前HCC-9204、SMMC-7721细胞端粒酶活性和hTERTmRNA检测结果

2.转染前HCC-9204、SMMC-7721 p53蛋白和mRNA检测结果

3.转染后HCC-9204、SMMC-7721细胞形态和生长变化

4.转染后细胞p53基因表达变化

5.p53转染对HCC-9204、SMMC-7721细胞端粒酶/hTERT表达影响

6.p53转染对细胞Bcl-2、p21 WAF1表达影响

7.流式细胞仪检测结果

8.琼脂糖凝胶电泳检测凋亡

讨论

小结

参考文献

附照片

附录

致谢

综述