不同地理种群灰飞虱的RAPD分析及病毒检测

摘要

灰飞虱(Laodelphaxstriaellus)是传播水稻条纹叶枯病毒的主要介体昆虫.该文利用RAPD技术对采自9个地区的灰飞虱地理种群进行了遗传多样性分析,按Neighbor-joning聚类法构建了这9个灰飞虱种群的分子系统树.该系统树分为2簇,簇1包括北京、福建、海南、辽四川、上海、云南地区的灰飞虱种群.簇2包括宁夏和东京地区的两个灰飞虱种群.研究表明不同地区灰飞虱种群间的遗传距离与其地理距离不呈相关性.该文通过改进RNA的制备方法,完善了利用RT-PCR检测植物病毒的方法.实验结果表明RT-PCR检测技术比斑点免疫结合测试(DotImmunobingdingAssay,DIBA)技术更灵敏,更可靠,且不受乙醇固定虫的影响.

目录

文摘

英文文摘

第一章前言

1.水稻条纹叶枯病毒

1.1水稻条叶枯病

1.2水稻条纹叶枯病毒

1.3RSV的控制

2.昆虫遗传多样性的RAPD分析

2.1遗传多样性的分子检测方法

2.2 RAPD在昆虫遗传多样性研究上的应用

3.RSV的检测

3.1植物病毒的分子检测方法

3.2利用RT-PCR检测植物病毒

4.本论文的目的

第二章不同地理种群灰飞虱遗传多样性的RAPD分析

1.引言

2.材料和方法

2.1.虫源

2.2主要试剂

2.3步骤

2.4数据分析

3.结果分析

3.1模板DNA的提取

3.2随机引物筛选及扩增结果

3.3灰飞虱种群间的遗传距离

4.讨论

第三章RSV在介体灰飞虱、植物宿主内的RT-PCR检测及与斑点免疫结合测试的比较

1.引言

2.材料与方法

2.1 RT-PCR检测植物和介体昆虫体内的RSV

2.2斑点免疫测试

3.结果

3.1水稻稻苗和单头灰飞虱检测结果

3.2斑点免疫结合测试

4.讨论

4.1 RT-PCR检测技术

4.2斑点免疫结合测试与RT-PCR的比较

第四章抗水稻条纹叶枯病毒P20蛋白多肽的筛选

1.前言

1.1 M13噬菌体展示的载体

1.2噬菌体展示文库

1.3生物筛选

1.4随机短肽噬菌体展示文库的应用

2.材料和方法

2.1主要材料

2.3方法

3.结果与讨论

参考文献

附录

致谢