AP-1对Ox-LDL诱导大鼠肾系膜细胞TGF-β表达的转录调控及基因治疗研究

摘要

在该文中,我们拟通过实验观察AP-1是否参与调控Ox-LDL刺激MsC表达TGF-β<,1>的转录过程;了解Ox-LDL激活AP-1可能涉及的信号转导通路.在明瞭AP-1活化的信号转导通路及其与TGF-β<,1>表达关系的基础上,尝试着以AP-1作为靶作用点,针对Ox-LDL刺激的TGF-β<,1>表达上调进行了基因治疗.结论：1.在国内首次克隆并测序了大鼠TGF-β<,1>基因上游调控序列长达1608bp的片段,分析了该序列-1550到-845之间的Ox-LDL应答元件.2.首次论证了c-Jun/AP-1至少是部分地从转录水平参与调控Ox-LDL诱导的TGF-β<,1>表达上调.3.首次阐述了Ox-LDL诱导TGF-β<,1>过度表达的具体分子机制.我们认为：在培养的MsC中,Ox-LDL可能通过JNK和PKC信号转导通路激活c-Jun/AP-1,然后由后者上调TGF-β<,1>的转录效率,从而最终导致TGF-β<,1>的过度表达.在国内外首次,较为明晰地阐述了Ox-LDL引起脂质性肾损伤的可能分子机制.4.首次尝试着对针对核转录因子AP-1,用AP-1 decoy ODNs在细胞水平对Ox-LDL诱导的TGF-β<,1>过度表达进行了基因治疗.

目录

前言

第一章大鼠肾系膜细胞TGF-β1基因上游调控序列的构建及分析

材料和方法

材料

方法

结果

讨论

图表

第二章AP-1在OX-LDL诱导大鼠肾系膜细胞TGF-β1基因转录中的作用

第一节AP-1诱捕和c-Jun/AP-1抑制剂对TGF-β1基因转录的影响

材料和方法

结果

讨论

图表

第二节AP-1结合位点突变和抑制剂对TGF-β1基因上游调控序列—一报告基因活性的影响

材料和方法

结果

讨论

图表

第三章氧化低密度脂蛋白激活AP-1可能的信号转导通路

材料和方法

材料

方法

结果

讨论

图表

第四章利用AP-1寡脱氧核苷酸对氧化低密度脂蛋白上调的TGF-β 1表达进行基因治疗

材料和方法

材料

方法

结果

讨论

图表

参考文献

全文结论

创新点

获奖情况

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致谢

综述

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