基于ehCG新型肿瘤基因疫苗的分子设计及其抗瘤效应

摘要

肿瘤疫苗是利用肿瘤抗原激发机体产生特异性的免疫应答,以达到治疗肿瘤或预防肿瘤复发的作用.靶抗原及其免疫方式(载体)的选择是肿瘤疫苗所涉及的两个关键因素.自Gailani等报道非滋养层肿瘤细胞异位表达人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotrophin,hCG)以来,肿瘤细胞表达的异位hCG(ectopice hCG,ehCG)与肿瘤发生、发展的关系受到人们关注.根据文献报道及我们前期的研究结果证实,许多不同类别和组织来源的肿瘤细胞都能不同程度地表达ehCG.多数学者认为,对于非妊娠机体,只有当细胞发生恶性转化时,静息胚胎基因才被激光而表达ehCG.肿瘤细胞自分泌的ehCG具有生长因子活性,能促进和调控肿瘤细胞的增殖、分化和生长,使肿瘤细胞在其微环境中能自我生长;膜结合型ehCG使肿瘤细胞表面呈负电荷,推测可能与肿瘤的转移特性、免疫耐受等有一定的关系,因而,以ehCG为靶抗原的肿瘤疫苗已成为肿瘤生物治疗新的研究热点.Moulto等曾用ehCG蛋白疫苗诱导机体产生了特异性体液免疫应答,但由于蛋白免疫未诱生高水平的特异性细胞免疫应答,因而其抗瘤效果有待提高.基因免疫(genetic immunization)是将含抗原编码基因的真核表达载体直接注入机体,利用宿主细胞表达相应抗原,从而诱导机体产生特异性免疫应答.与传统蛋白疫苗相比,基因免疫不仅能诱导特异性体液免疫应答,而且可诱导特异性细胞免疫应答;载体DNA中含有由CpG基序组成的免疫刺激序列(ISS),可发挥重要的佐剂作用,有助打破一些自身抗原的免疫耐受,国内外在以原癌基因HER-2/neu为靶抗原的基因疫苗研究中已取得了一定的进展.因此,基因疫苗在肿瘤免疫方面有潜在的应用价值.基于上述分析,该课题以ehCG及相关肽为靶抗原设计肿瘤基因疫苗,通过基因免疫手段免疫小鼠以诱导特异性免疫应答及抗瘤效应,为肿瘤生物治疗寻找新的途径.

目录

英文缩写

前言

第一部分ehCG与肿瘤关系的研究

材料与方法

结果

讨论

第二部分ehCGβ新型肿瘤基因疫苗的构建及其诱导的特异性免疫应答

材料与方法

结果

讨论

第三部分ehCGβ新型肿瘤基因疫苗的抗肿瘤作用及其机制研究

材料与方法

结果

讨论

第四部分基于ehCGβT109-Q145新型肿瘤基因疫苗的分子设计

材料与方法

结果

一、ehCGβ关键抗原肽的选择及基本思路

二、ehCGβT109-Q145新型肿瘤基因疫苗的分子设计

三、ehCGβT109-Q145新型肿瘤基因疫苗的构建与鉴定

讨论

第五部分ehCGβT109-Q145新型肿瘤基因疫苗诱导的免疫应答及其抗瘤效应

材料与方法

结果

讨论

小结

参考文献

文献综述肿瘤疫苗及其分子设计

致谢

附录

论文独创性声明和论文使用授权声明