胸苷磷酸化酶及其调节剂干扰素-α在肝癌使用氟尿嘧啶前体药化疗中作用的研究

摘要

干扰素-α(IFN-α)是Ⅰ型干扰素,具有抗病毒感染,促进细胞分化,调节细胞增殖和免疫等多种功能,近年又发现IFN-α能上调肿瘤组织或细胞中TP表达或活性,而该所王鲁等发现,在大剂量时又具有抑制肿瘤新生血管形成的作用.临床研究表明,联合应用IFN-α与氟尿嘧啶类药物及其它化疗药,可使部分不能切除的肝癌病人获得临床治愈的可能.因此该课题拟研究转染TP cDNA与应用干扰素-α两种途径调节肝癌细胞TP表达的可行性,以及TP表达改变后对细胞凋亡、诱导内皮细胞移动能力及药物敏感性的变化,以期寻找合适的IFN-α剂量,达到既能上调TP表达提高肝癌对氟尿嘧啶前体药的敏感性,又能抑制TP表达上调后诱导血管生成增强的不良作用.1.转染TP cDNA能通过上调TP mRNA的表达提高肝癌细胞SMMC-7721对5-dFUrd的敏感性.但转染TP cDNA转导致细胞凋亡减少,诱导内皮细胞移动能力增强.2.IFN-α能上调SMMC-772细胞TP mRNA的表达,存在一定程度的剂量-时间依赖性.一定浓度的IFN-α能提高细胞对5'-dFUrd的敏感性,对5-FU的敏感性影响不大.3.一定浓度的IFN-α(10,000U/ml)处理的SMMC-7721细胞,TP mRNA的表达增加,但凋亡细胞未减少,诱导内皮细胞移动能力未增强.4.IFN-α剂量为1.5×10<'7>U/kg/day能上调荷SMMC-7721裸鼠皮下瘤组织中TP的表达,而不增加MVD.5.体内联合应用IFN-α与卡培他滨具有协同抑制LCI-D20原位瘤生长的作用,而联合应用IFN-α与5-FU仅具有相加作用.就体重变化而言,联合用药无明显毒性反应.主要副作用为肾毒性.

目录

前言

第一部分转染胸苷磷酸化酶cDNA提高肝癌对氟尿嘧啶前体药敏感性的研究主要试剂及仪器设备

一.构建TP cDNA的真核表达载体

材料与方法

结果

二.TP cDNA基因转染及阳性转染克隆的筛选

材料和方法

结果

三.转染TP cDNA对细胞形态及功能的影响

材料及方法

结果

讨论

第二部分干扰素调节肝癌细胞胸苷磷酸化酶表达的体内外研究

材料与方法

结果

讨论

第三部分干扰素联合氟尿嘧啶类药物抑制肝癌生长的实验研究

材料与方法

结果

讨论

参考文献

全文总结

后记和致谢

综述 胸苷磷酸化酶在氟尿嘧啶类化疗药生物调节中作用的研究

研究生期间完成的论著目录

附录2(文章全文)

论文独创性声明和论文使用授权声明