活血化瘀中药和单体对SScFb增殖和Ⅰ、Ⅲ型前胶原基因转录影响的研究

摘要

系统性硬皮病(Systemic Sclerosis,SSc)是以皮肤和内脏器官纤维硬化为主要表现的结缔组织疾病,目前该病发病机制尚未完全清楚,治疗效果欠佳.该文重点在病因方面研究成纤维细胞(fibroblasts,Fb)在其发病环节中的作用,探讨患者成纤维细胞胶原代谢方面的异常和细胞因子TGF-β<,1>与此异常的关系;治疗方面研究活血化瘀中药及中药单体对SSc患者FbⅠ、Ⅲ型前胶原基因转录的影响.首先,建立了来自SSc患者和正常对照的Fb原代培养细胞各五株.比较了两种细胞基本的生物学特点,SSc组和对照组的一代生长期相似,潜伏期约为48h,指数增殖期为48~96h,停滞期为120~168h.两组的生命期也无明显差异,共可传约30代左右.所以SSc组Fb并无特殊的生长增殖特点,同正常Fb一样经历一定的生长增殖过程后,衰老死亡.其次,探讨SSc患者FbⅠ型前胶原基因表达的特点,细胞自身分泌的转化生长因子TGF-β<,1>是否是Ⅰ型胶原α1链(COL1A1)mRNA表达增高的原因.采用核酸原位杂交和免疫印迹法分别测定培养的硬皮病和正常人Fb中COL1A1 mRNA的表达和TGF-β<,1>蛋白质的含量.最后,研究活血化瘀中药和中药单体对SSc患者Fb增殖和Ⅰ型、Ⅲ型前胶原基因表达的影响,以期筛选出一些可以影响其表达的中药和中药单体.综上所述,从对已经长期用于治疗SSc并有一定疗效的活血化瘀中药中选取的丹参、茜草、赤芍的细胞和分子药理机制方面的研究结果显示,丹参、茜草、赤芍能够抑制SScFb增殖和Ⅰ型、Ⅲ型前胶原mRNA表达,这可能是其能够有效治疗SSc的原因之一.对其中的部分有效成分的深入研究结果显示,单体积雪草甙、丹参酮IIA、丹参素钠、丹参多酚酸盐、原儿茶醛、CRA、CRP不仅对SScFb增殖具有一定的抑制作用,而且能够减少Ⅰ型、Ⅲ型前胶原mRNA表达,具有应用于临床的价值和前景,今后可进一步进行相关的动物或人体实验,为临床应用奠定基础.

目录

ABSTRACT

前言

第一部分系统性硬皮病成纤维细胞生长及增殖特性

材料和方法

结果

讨论

图片

第二部分SSc FbⅠ型胶原mRNA表达与转化生长因子β1关系的研究

材料和方法

结果

讨论

图片

第三部分活血化瘀中药及单体对SScFb增殖及Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达的影响

一活血化瘀中药及单体对Fb增殖的影响

材料和方法

结果

讨论

图片

二活血化瘀中药及单体对SSc FbⅠ、Ⅲ型前胶原mRNA表达的影响

材料和方法

结果

讨论

图片

全文结语

参考文献

创新之处

综 述：β-转化生长因子对硬皮病成纤维细胞影响的研究进展

综 述：抗纤维化药物对系统性硬皮病成纤维细胞影响的研究进展

发表文章及获奖情况

致谢

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