黏液型/圆细胞型脂肪肉瘤FUS-CHOP融合基因及其诊断价值的研究

摘要

目的：探讨在福尔马林固定、石蜡包埋组织中检测FUS-CHOP融合基因的可行性及其对黏液型/圆细胞型脂肪肉瘤的诊断和鉴别诊断的价值，并探讨黏液型/圆细胞型脂肪肉瘤染色体易位发生的可能机制。　　方法：收集黏液型/圆细胞型脂肪肉瘤档案标本44例，以非典型性/分化良好型和多形性脂肪肉瘤、低度恶性黏液性纤维肉瘤/黏液性恶性纤维组织细胞瘤、多形性脂肪瘤等作为阴性对照，共60例。所有标本均为福尔马林固定、石蜡包埋组织。用嵌套式逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测FUS-CHOP融合基因mRNA表达，以看家基因PGK作为内对照检测mRNA质量；采用长距离PCR和DNA测序技术(pMD18-T载体克隆测序或“引物步移法”测序)，对9例黏液型/圆细胞型脂肪肉瘤新鲜标本FUS-CHOP、EWS-CHOP基因组DNA进行了扩增和序列测定，并对其序列特征进行了分析。　　结论：1、嵌套式RT-PCR方法检测FUS-CHOPmRNA表达可用于福尔马林固定、石蜡包埋组织。2、嵌套式RT-PCR方法检测FUS-CHOP敏感性较高，特异性强，可用于黏液型/圆细胞型脂肪肉瘤的诊断和鉴别诊断。3、黏液型/圆细胞型脂肪肉瘤染色体易位断裂点旁存在一些特征性序列，包括Alu重复序列、易位素识别序列、拓扑异构酶Ⅱ识别位点、寡核苷酸回文序列、卡序列、嘌呤/嘧啶交替序列、多嘌呤或多嘧啶序列等，可能与其染色体易位发生机制有关。4、易位素识别系列、拓扑异构酶Ⅱ识别位点、Alu重复序列和寡核苷酸回文序列可能在黏液型/圆细胞型脂肪肉瘤染色体易位发生中是缺一不可的，另外在个别病例中可能还涉及到卡序列、嘌呤/嘧啶交替序列、多聚腺嘌呤/多聚胸腺嘧啶序列等。

目录

前言

参考文献

第一部分：黏液型/圆细胞型脂肪肉瘤石蜡包埋组织中FUS-CHOP融合基因检测的临床病理学意义

材料和方法

结果

一MRCLs临床病理表现

一MRCLs临床病理表现

二、MRCLs及对照肿瘤PGK检出率

三、不同肿瘤FUS-CHOP融合基因mRNA表达率

讨论

小结

参考文献

第二部分：黏液型/圆细胞型脂肪肉瘤t(12；16)、t(12；22)易位断裂点基因组DNA序列测定和特征分析

材料和方法

结果

一、黏液型/圆细胞型脂肪肉瘤FUS-CHOP及EWS-CHOP基因组DNA长距离PCR扩增及测序结果

二、FUS-CHOP、EWS-CHOP基因断裂点基因组DNA序列特征

讨论

小结

参考文献

附录：攻读博士学位期间发表及待发表的论文题录

文献综述脂肪肉瘤的细胞和分子遗传学研究

参考文献

致谢

论文独创性声明及论文使用授权声明