比较蛋白质组定量分析及其在疾病研究中的应用

摘要

蛋白质组学技术是生命科学中的分析化学的主要内容,是当前的研究前沿,是化学生物学近年来的新研究方向.该论文工作是在建立蛋白质组研究实验室的过程中,建立和发展了蛋白质组、比较蛋白质组和定量蛋白质组研究的相关技术平台,并将其应用于人类重大疾病的研究.定量蛋白质组学是通过某种方法或技术,对生物样品(细胞、组织或体液等)在某些过程中蛋白质的含量进行比较分析.从蛋白质组水平上对基因表达进行准确的定量分析,是比较蛋白质组学的重要内容,是当前研究重大疾病致病机制以及药理控制机制的必要手段及研究前沿.该论文工作的主要贡献是,建立了一套稳定可靠的蛋白质提取-双向凝胶电泳分离-半自动胶上酶解-质谱鉴定的高通量技术分析平台;建立了一种新的、基于肽段乙酰基化的稳定同位素标记定量蛋白质组分析技术,并在实际生物样品体系中进行了验证;将建立、优化的蛋白质组定量分析技术应用于动脉粥样硬化、冠心病以及肝癌的复发转移相关的多个实际生物样品的比较分析,并从分子水平上评价了几种药物的药效.该文还研究了对基于生物素-抗生物素蛋白特异性结合的亲和色谱分离体系,结果显示该体系有望实现与乙酰基化同位素标记技术的有效对接,建立新的定量分析技术.

目录

文摘

英文文摘

第一章前言

第一节蛋白质组学及其发展现状

第二节比较蛋白质组学及其主要进展

第三节复蛋白质组体系的简化

第四节本论文的工作

第二章高通量双相凝胶电泳分离-质谱鉴定蛋白质组学方法建立

第一节蛋白质的顺序提取方法和双相凝胶电泳分离

1.研究背景

2.实验部分

3.结果与讨论

第二节半自动化胶上酶解-质谱鉴定方法的建立与优化

1.研究背景

2.实验部分

3.结果与讨论

本章小结

第三章双相凝胶电泳定量蛋白质组学对疾病的研究

第一节动脉粥样硬化细胞模型差异蛋白质组分析

1.研究背景

2.实验部分

3.结果与讨论

第二节高脂饮食致动脉粥样硬化家兔血管和肝脏组织差异蛋白质分析及辛伐他汀药理作用的研究

1.研究背景

2.实验部分

3.结果与讨论

4.结论

第三节不同转移潜能肝癌细胞系的差异蛋白质组分析

1.研究背景

2.实验部分

3.结果与讨论

4结论

本章小结

第四章稳定同位素标记定量蛋白质组学研究

第一节肽段氨基乙酰化反应的系统研究和反应条件的优化

1.研究背景

2.实验部分

3.结果与讨论

第二节肽段氨基乙酰化同位素标记结合1D-PAGE分离定量分析方法的建立与应用

1.研究背景

2.实验部分

3.结果与讨论

本章小结

第五章基于生物素-抗生物素蛋白亲和分离的初步研究

第一节蛋白质生物素化反应条件的优化

1.研究背景

2.实验部分

3.结果与讨论

第二节衍生化蛋白质胰蛋白酶酶解肽段的质谱鉴定及亲和分离的初步研究

1.研究背景

2.实验部分

3.结果与讨论

本章小结

第六章本论文主要参考文献

一、蛋白质组技术

二、双相凝胶电泳分离-质谱鉴定技术(2DE-MS)

三、稳定同位素标记定量分析

四、疾病研究

五、亲和色谱分离技术

六、中药及中药蛋白质组学

七、参考书目

八、其他

附：博士期间发表论文及课题申请

一、研究论文

二.会议论文

三、课题申请

四、参编书目

致谢

论文独创性声明及论文使用授权声明