用悬浮芯片技术定量检测多种病原体的研究

摘要

目的：利用悬浮芯片技术，探讨直接从“白色粉末”样品中同时检测5种病原体(细菌、细菌芽孢、病毒、细菌毒素、植物毒素)的可行性，为建立快速、敏感、特异、高通量、同时检测多种生物恐怖因子的技术平台奠定基础。 方法：用抗体包被编码微球作为反应载体，双抗体夹心法为反应模式，建立5种代表性的病原体悬浮芯片检测方法，对“白色粉末”中的鼠疫耶尔森菌、炭疽芽孢、葡萄球菌肠毒素B、蓖麻毒素、SARS冠状病毒同时进行检测。通过盲样和标准实验室检测评估对现场样品的适用性。 结果：建立的悬浮芯片多病原体检测系统具有较高的特异性和敏感性，检测鼠疫耶尔森菌、炭疽芽孢、葡萄球菌肠毒素B、蓖麻毒素、SARS冠状病毒N蛋白的灵敏度分别为67.5 cfu/mL、10<'3>cfu/mL、0.203 ng/mL、29.1 ng/mL、4．86 ng/mL，并分别在10<'2>～10<'8>cfu/mL、10<'3>～10cfu/mL、0.02-152.7 ng/mL、3.56-100852.1ng/mL、0.391-25600 ng/mL浓度范围内具有良好的动力学响应特性，比ELISA方法有较高的灵敏度和较宽动态检测范围。 结论：多病原体悬浮芯片检测系统能快速、敏感、特异、同时地定量检测“白色粉末”中的五种病原体，在早期识别、快速诊断和应对生物恐怖威胁、传染病暴发中具有广阔的应用前景。

目录

论文说明：本研究中的缩略语

声明

摘要

引言

1面临生物威胁的形势

2.生物恐怖因子的种类

3.生物恐怖因子的检测技术

4.悬浮芯片及其应用概况

5.本研究的目的、意义

参考文献

第一部分悬浮芯片定量检测方法的建立

引言

1.材料与方法

1.1材料

1.2方法

2.结果

2.1悬浮芯片检测方法的优化

2.2 ELISA方法的优化

2.3悬浮芯片定量检测模型的建立

2.4悬浮芯片检测鼠疫菌方法的特异性

2.5悬浮芯片与ELISA方法检测鼠疫菌F1抗原的比较

3.讨论

4.小结

参考文献

第二部分病原体多重悬浮芯片检测方法建立与初步评价

引言

1材料与方法

1.1材料

1.2方法

2结果

2.1悬浮芯片检测方法的优化

2.2悬浮芯片五种病原体多重检测模式的建立

2.3悬浮芯片方法检测病原体的标准曲线

2.4 X-MAP与ELISA方法检测敏感度和检测范围比较

2.5 X-MAP方法检测目的分析物在有其他对象干扰情况下的灵敏度

2.6 X-MAP方法的特异性

2.7 X-MAP定量检测五种病原体

2.8“白色粉末”污染样品检测结果

2.9样品测试

2.10盲样检测

3讨论

4小结

参考文献

第三部分结论

综述：编码微球悬浮芯片技术及其应用

博士在学期间发表和待发表的论文

博士在学期间申请及获得的专利

致谢