MDR1、MRP2基因多态性在癫痫患者中的分布及其与癫痫耐药的相关性研究

摘要

癫痫是一种常见病，以脑部神经元过度发放所致的突然、反复和短暂的中枢神经系统功能失常为特征。对癫痫患者进行各种药物治疗后，仍有20-30％的病人未能得到有效控制。大量研究表明，这可能与患者的药物耐受基因有关。本课题通过分子流行病学方法，研究MDR1和MRP2基因多态性在癫痫患者中的分布及其与耐药的相关性，以及该多态性与卡马西平、丙戊酸钠药物剂量和血药浓度的关系。本研究主要由三部分构成。 第一部分： MDR1 C3435T、MRP2 C3972T 多态性在癫痫患者的分布及其与癫痫耐药的关系。 目的： 观察多药耐药基因MDR1 exon26 C3435T和MRP2 exon28 C3972T多态性在癫痫患者中的分布特点，并探讨其与癫痫耐药的相关性。 方法： 以常规酚-氯仿方法提取患者外周血 DNA，分别以 PCR-RFLP 法和荧光定量PCR法检测MDR1基因exon 26 C3435T的多态性和MRP2基因exon 28C3972T 的多态性。应用病例对照研究，分别分析两个基因多态性在癫痫患者中的分布特点，并探讨其与癫痫耐药的相关性。 结论： 癫痫患者中 MDR1 C3435T的CC、CT和TT基因型频率分布、MRP2C3972T的GG和GA基因型频率分布与正常对照组均无显著差异。MDR1 C3435I、的CC基因型与癫痫耐药相关。未发现MRP2 C3972T的GG基因型与耐药的联系。 第二部分：不同 MDR1 C3435T、MRP2 C3972T基因型癫痫患者的临床疗效随访研究。 目的： 探讨不同基因型对癫痫治疗效果的影响，验证第一部分病例对照研究的结果。 方法： 应用前瞻性研究，随访不同基因型患者的临床疗效，观察不同基因型患者耐药发生率的差异，并计算不同基因型患者发生耐药的相对危险度。 结论： CC基因型患者可能更易于发生耐药，TT基因型患者可能更易于控制有效，CT基因型患者则介于两者之间。 第三部分 ：MDR1 C3435T、MRP2 C3972T多态性与癫痫患者卡马西平、丙戊酸钠剂量及血药浓度的相关性。 目的： 比较不同基因型组患者卡马西平(CBZ)和丙戊酸钠(VPA)用药剂量和血药浓度的差异。 方法： 应用高效液相色谱法和荧光偏振免疫分析方法分别测定CBZ、卡马西平环氧化代谢产物(CBZE)、VPA的血药浓度，分析这两个基因多态性与患者CBZ、VPA剂量及浓度的关系。结果：耐药组患者每公斤体重的CBZ剂量、CBZE浓度和VPA剂量高于控制组，具有统计学差异；耐药组患者每公斤的CBZ浓度高于控制组，而VPA浓度低于控制组，未见显著性差异。在MDR1的不同基因型组比较中，每公斤体重的CBZ剂量，CBZ和CBZE浓度均为CC型最高，CT型居中，TT型最低；VPA剂量为TT型最高，CC型居中并略高于CT型；VPA浓度为CT型最高，CC型居中，TT型最低。以上变量组间比较均无统计学差异。在MRP2的不同基因型组比较中，GG基因型的CBZ剂量高于GA组，CBZ和CBZE浓度低于GA组；VPA剂量和VPA浓度均高于GA组，但未发现统计学差异。 结论： MDR1 C3435T不同基因型与CBZ剂量与浓度有关，CC型患者可能需要比TT型患者更高的剂量和浓度，才能达到控制发作的效果。尚未看到MDR1C3435T各基因型与VPA剂量、浓度的相关性。亦未看到MRP2 C3972T的GG型、GA 型与CBZ、VPA剂量、浓度间的相关性。

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摘要

前 言

第一部分MDR1 C3435T、MRP2 C3972T多态性在癫痫患者的分布及其与癫痫耐药的关系

材料与方法

结果

讨 论

第一部分小结

参考文献

第二部分不同MDR1 C3435T、MRP2 C3972T基因型癫痫患者的临床疗效随访研究

材料与方法

结果

讨 论

第二部分小结

参考文献

第三部分MDR1 C3435T、MRP2 C3972T多态性与癫痫患者卡马西平、丙戊酸钠剂量及血药浓度的相关性

材料与方法

结果

讨 论

第三部分小结

参考文献

全文小结

附录

综述 癫痫耐药的相关机制研究

发表论文

致 谢