肿瘤坏因子受体在慢性高眼压大鼠视网膜中的表达

摘要

目的:通过研究慢性高眼压大鼠视网膜TNFR1及TNFR2在不同层次、不同细胞中的表达变化情况,探索TNFα-TNFR系统在青光眼视网膜神经节细胞损伤中的可能作用机制。
　　 方法:
　　 1.采用结扎3根上巩膜静脉联合术后球结膜下注射5-Fu的方法建立大鼠慢性高眼压模型。
　　 2.取正常大鼠眼球8只,及建模成功后3天、7天、14天、28天高眼压眼球各8只,假手术眼球各8只,取视网膜后通过免疫印迹方法检测TNFR1和TNFR2蛋白的表达变化。
　　 3.取正常大鼠眼球6只,及建模成功后3天、7天、14天、28天高眼压眼球各6只,冰冻切片后行TNFR1和TNFR2免疫荧光单标染色,TNFR1-NF200、TNFR1-GFAP、TNFR1-OX42、TNFR2-NF200、TNFR2-GFAP、TNFR2-OX42免疫荧光双标染色。
　　 4.取正常大鼠眼球6只,及建模成功后14天高眼压眼球6只,视网膜铺片后行TNFR2-NF200免疫荧光双标染色。
　　 结果:
　　 1.应用结扎3根上巩膜静脉联合术后球结膜下注射5-Fu方法,可在术后28天内成功诱导大鼠慢性高眼压模型,但术后远期模型稳定率不高。
　　 2.高眼压作用下,视网膜TNFR1及TNFR2表达均上调。TNFR2对于高眼压刺激反应较TNFR1更为灵敏,在术后3天即出现明显上调,且表达增强幅度更加明显。表达增强的TNFR1主要位于视网膜星形胶质细胞和内丛状层,而TNFR2在视网膜神经节细胞、星形胶质细胞和视网膜内层的小胶质细胞中均有表达。
　　 3.高眼压作用下,表达增强的TNFR2主要位于小直径RGCs上,而在大、中直径RGCs中TNFR2表达微弱。
　　 结论:在慢性高眼压作用下,不同类型TNFR在视网膜中不同细胞上的表达差异可能对TNF-α在青光眼中所介导的不同效应有着重要的影响。